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shuifen1108金蟲 (正式寫手)
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[求助]
PCR產(chǎn)物回收之后跑膠濃度過(guò)低
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PCR之后，切膠，用Takara回收膠試劑盒回收的，結(jié)果跑膠之后發(fā)現(xiàn)濃度很低，請(qǐng)教各位大俠，能不能用于下一步的PCR？切還有就是回收產(chǎn)率低的原因有哪些？完膠之后放入-20度保存一段時(shí)間再回收，會(huì)對(duì)回收產(chǎn)率有影響嗎？注明所用的marker DL2000,4ul，樣品每個(gè)3ul。 [ Last edited by shuifen1108 on 2011-11-2 at 20:09 ] |
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shuifen1108
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5樓2011-11-02 22:35:17
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
shuifen1108(金幣+1): 2011-11-03 11:24:32
西瓜(金幣+3): good 2011-11-05 21:58:54
shuifen1108(金幣+1): 2011-11-03 11:24:32
西瓜(金幣+3): good 2011-11-05 21:58:54
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1.可能你本身PCR產(chǎn)物都不是很亮，這一點(diǎn)你可以多擴(kuò)幾管PCR解決。 2.膠回收是有一個(gè)回收率的問(wèn)題，一般在50-70%，如果你只擴(kuò)到了100ngPCR產(chǎn)物，那經(jīng)跑膠再切膠再過(guò)柱回收，估計(jì)能得到50ng也就不錯(cuò)了。。。 3.溶膠時(shí)間的確不需那么長(zhǎng)，充分溶了即可，溶膠液時(shí)間過(guò)久一般對(duì)DNA有損傷。 4.聯(lián)系Takara技術(shù)支持尋求幫助。 |
8樓2011-11-03 10:28:54
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2011-11-02 21:22:40
★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金幣+4): 鼓勵(lì)新蟲多發(fā)貼！鼓勵(lì)多來(lái)分子生物版！有獎(jiǎng)勵(lì)！ 2011-11-02 21:24:55
wanhscn(金幣+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2011-11-02 21:25:03
shuifen1108(金幣+2): 2011-11-03 11:23:51
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shuifen1108(金幣+2): 2011-11-03 11:23:51
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3樓2011-11-02 21:24:03
西瓜
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4樓2011-11-02 21:39:53
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6樓2011-11-02 22:37:26
7樓2011-11-03 09:51:52
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9樓2011-11-03 11:23:21
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10樓2011-11-03 11:25:28
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