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水紅藍(lán)調(diào)新蟲 (小有名氣)
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[求助]
如何測定培養(yǎng)基中的殘?zhí)呛?
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| 我在大腸桿菌的培養(yǎng)中用葡萄糖做碳源，然后想測定一下葡萄糖的殘量，有沒有相關(guān)童鞋測定過的？尋求比較簡單方便的辦法。。之前看的文獻(xiàn)中的使用儀器都太復(fù)雜了。。。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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scelab(金幣+6): 鼓勵新蟲~~~謝謝交流 2011-11-06 02:03:35
scelab(金幣+6): 鼓勵新蟲~~~謝謝交流 2011-11-06 02:03:35
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1 葡萄糖測定 （1）1mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 小燒杯取分析純葡萄糖置于烘干箱中烘干至，于分析天平中準(zhǔn)確稱取80℃烘至恒重的分析純葡萄糖10mg，置于小燒杯中，加少量蒸餾水溶解后，轉(zhuǎn)移到10mL 容量瓶中，用蒸餾水定容至10mL，混勻，4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?br /> （2）3,5-二硝基水楊酸（DNS）試劑 將 6.3g DNS （分析天平中稱取于小燒杯）和262mL 2M NaOH 溶液（大量筒稱取250ml+小量筒稱取12ml），加到500mL（量杯量取） 含有185g 酒石酸鉀鈉的熱水溶液中（在微波爐中加熱1min溶解），再加5g 結(jié)晶酚和5g 亞硫酸鈉，攪拌溶解，冷卻后加蒸餾水定容至1000mL，貯于棕色瓶中備用。 1． 制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 取 7 支10mL 具塞刻度試管編號，按表1分別加入濃度為1mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水和3,5-二硝基水楊酸（DNS）試劑，配成不同葡萄糖含量的反應(yīng)液。 1mg/ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 蒸餾水 DNS 葡萄糖含量 光密度值 管號 （ml） （ml） （ml） （mg/ml） （OD540） 0 0 1 0.75 0 1 0.1 0.9 0.75 0.01 2 0.2 0.8 0.75 0.02 3 0.3 0.7 0.75 0.03 4 0.4 0.6 0.75 0.04 5 0.5 0.5 0.75 0.05 6 0.6 0.4 0.75 0.06 將各管搖勻，取試管架置于水浴鍋中，在沸水浴中準(zhǔn)確加熱5min，取出，冷卻至室溫，用蒸餾水定容至10mL，加塞后顛倒混勻，在分光光度計上進(jìn)行比色（分光光度計預(yù)熱20分鐘）。調(diào)波長540nm，用0 號管調(diào)零點，測出1~6號管的光密度值。以光密度值為縱坐標(biāo)，葡萄糖含量（mg）為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
18樓2011-11-05 14:39:30
brightfuture01
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3樓2011-11-03 10:37:52
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4樓2011-11-03 20:29:08
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7樓2011-11-03 22:29:20
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10樓2011-11-04 08:12:54
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