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[求助]
殼聚糖固定化酶，沒有活力。求原因 已有1人參與
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| 固定方法就是一般的將殼聚糖制備成微球，然后進(jìn)行固定 |
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3樓2011-11-14 21:57:33
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稱取一定質(zhì)量的殼聚糖溶于4%的冰醋酸中，用注射器滴加到含有20%NaOH和30%甲醇組成的凝結(jié)夜中，殼聚糖載體立即形成均勻的微球，用蒸餾水洗滌至中性后，于pH11.0緩沖液中保存?zhèn)溆谩?br />
抽濾上述溶液，所得固體微球置于0.5%的戊二醛溶液中，于30℃恒溫振蕩器中反應(yīng)4h，再抽濾，用水和丙酮反復(fù)洗滌微球，直至微球上不含游離戊二醛為止。在交聯(lián)后的微球載體中加入一定量Alcalase2.41堿性蛋白酶溶液，室溫下攪動2h，置于4℃冰箱過夜次日離心棄去溶液，水洗除去未固定上的酶溶液后得固定化堿性蛋白酶，置于4℃冰箱中保存。 在這個(gè)地方里面就是恒溫振蕩的時(shí)候采用的是攪拌了30分鐘左右。固定化是，每克殼聚糖 大概1000個(gè)活力單位 |
2樓2011-11-13 12:37:25
Emmar8139
木蟲 (正式寫手)
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4樓2011-11-15 22:24:33
5樓2011-11-15 23:37:18
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