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[求助]
殼聚糖固定化酶,沒有活力。求原因 已有1人參與
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| 固定方法就是一般的將殼聚糖制備成微球,然后進行固定 |
木蟲 (正式寫手)
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稱取一定質量的殼聚糖溶于4%的冰醋酸中,用注射器滴加到含有20%NaOH和30%甲醇組成的凝結夜中,殼聚糖載體立即形成均勻的微球,用蒸餾水洗滌至中性后,于pH11.0緩沖液中保存?zhèn)溆谩?br />
抽濾上述溶液,所得固體微球置于0.5%的戊二醛溶液中,于30℃恒溫振蕩器中反應4h,再抽濾,用水和丙酮反復洗滌微球,直至微球上不含游離戊二醛為止。在交聯(lián)后的微球載體中加入一定量Alcalase2.41堿性蛋白酶溶液,室溫下攪動2h,置于4℃冰箱過夜次日離心棄去溶液,水洗除去未固定上的酶溶液后得固定化堿性蛋白酶,置于4℃冰箱中保存。 在這個地方里面就是恒溫振蕩的時候采用的是攪拌了30分鐘左右。固定化是,每克殼聚糖 大概1000個活力單位 |
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