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GFP的相關(guān)問題 已有2人參與
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想請問下:如果GFP變性了還能發(fā)出熒光嘛? 另請教如果要同時做表面染色和胞內(nèi)染色(Brdu)需要注意什么? 感謝。! |
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變性了就不能發(fā)熒光了。只在390nm左右有一個吸收峰。因為GFP發(fā)射熒光是依托于整個分子的結(jié)構(gòu),發(fā)色團與很多氨基酸之間存在氫鍵,被激發(fā)的發(fā)色團需要通過氫鍵向Glutamate222轉(zhuǎn)移質(zhì)子,隨后才能發(fā)射熒光,可見氫鍵對于發(fā)色團的激發(fā)至關(guān)重要。變性的GFP沒有了發(fā)色團與周圍環(huán)境的氫鍵,所以只吸收不激發(fā) |

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