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chuanpenglw新蟲 (初入文壇)
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[求助]
原生質(zhì)體制備
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大家好,我現(xiàn)在要做真菌原生質(zhì)體誘變。關(guān)于原生質(zhì)體制備反面有很多不懂得? 請大家?guī)兔?br /> 溶壁酶和蝸牛酶是同一種酶么?買國產(chǎn)酶還是國外的? 要買哪些?什么公司有賣? 怎么計算形成率、再生率? 怎么過濾? 再生培養(yǎng)基是怎么回事?和普通培養(yǎng)基有啥區(qū)別?怎么選擇再生培養(yǎng)基? 真心求助,本人研一,知識淺薄。 望指教 |
金蟲 (小有名氣)

金蟲 (初入文壇)
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如果是做真菌原生質(zhì)體的話我推薦廣東省微生物研究所的溶壁酶,相當(dāng)好用,37攝氏度水浴搖1-2小時就可得到10的6次方到8次方的原生質(zhì)體。 再生率就是原生質(zhì)體涂板后統(tǒng)計平皿上原生質(zhì)體數(shù)目除以制備的原生質(zhì)體數(shù)目。例如,經(jīng)溶壁酶溶解并過濾洗凈的原生質(zhì)體取20ul到血球計數(shù)板觀察得到的原生質(zhì)體數(shù)位10的6次方每ml,而涂板加了200ul,最后統(tǒng)計平板上再生出的原生質(zhì)體為200個 再生率=200除以(10的6次方X0.2ML) 過濾一般用擦顯微鏡的擦鏡紙,4-8層即可 再生培養(yǎng)基又叫高滲培養(yǎng)基就是每升PDA培養(yǎng)基中加入1mol的山梨醇,以增高培養(yǎng)基的滲透壓,適合原生質(zhì)體生長 |

新蟲 (初入文壇)
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