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chuanpenglw新蟲 (初入文壇)
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[求助]
原生質(zhì)體制備
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大家好，我現(xiàn)在要做真菌原生質(zhì)體誘變。關(guān)于原生質(zhì)體制備反面有很多不懂得？ 請大家?guī)兔?br /> 溶壁酶和蝸牛酶是同一種酶么？買國產(chǎn)酶還是國外的？ 要買哪些�。渴裁垂居匈u？ 怎么計(jì)算形成率、再生率？ 怎么過濾��？ 再生培養(yǎng)基是怎么回事？和普通培養(yǎng)基有啥區(qū)別��？怎么選擇再生培養(yǎng)基？ 真心求助，本人研一，知識淺薄。 望指教 |
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chuanpenglw
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4樓2011-11-26 12:24:58
lvxingan1989
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2樓2011-11-25 12:33:18
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【答案】應(yīng)助回帖
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zhang8826857(金幣+6): 鼓勵新蟲+熱心應(yīng)助 2011-11-25 22:44:21
chuanpenglw(金幣+1): 謝謝你的回復(fù)，好高興有人回復(fù)，廣東省微生物研究所的溶壁酶，怎么買啊 2011-11-26 11:58:51
zhang8826857(金幣+6): 鼓勵新蟲+熱心應(yīng)助 2011-11-25 22:44:21
chuanpenglw(金幣+1): 謝謝你的回復(fù)，好高興有人回復(fù)，廣東省微生物研究所的溶壁酶，怎么買啊 2011-11-26 11:58:51
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如果是做真菌原生質(zhì)體的話我推薦廣東省微生物研究所的溶壁酶，相當(dāng)好用，37攝氏度水浴搖1-2小時(shí)就可得到10的6次方到8次方的原生質(zhì)體。 再生率就是原生質(zhì)體涂板后統(tǒng)計(jì)平皿上原生質(zhì)體數(shù)目除以制備的原生質(zhì)體數(shù)目。例如，經(jīng)溶壁酶溶解并過濾洗凈的原生質(zhì)體取20ul到血球計(jì)數(shù)板觀察得到的原生質(zhì)體數(shù)位10的6次方每ml,而涂板加了200ul，最后統(tǒng)計(jì)平板上再生出的原生質(zhì)體為200個 再生率=200除以（10的6次方X0.2ML） 過濾一般用擦顯微鏡的擦鏡紙，4-8層即可 再生培養(yǎng)基又叫高滲培養(yǎng)基就是每升PDA培養(yǎng)基中加入1mol的山梨醇，以增高培養(yǎng)基的滲透壓，適合原生質(zhì)體生長 |
3樓2011-11-25 21:25:53
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