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[交流] 酶在80℃熱水處理變性的問題

我是研究在某一溫度下蛋白質(zhì)變性程度以及空間結(jié)構(gòu)的變化問題，酶在80℃熱水中處理5min，時(shí)間要求很精確，處理結(jié)束是應(yīng)該馬上放冰浴中？還是放4℃冰箱中降溫？
想要有速度的話肯定是冰浴快，但是在高溫下馬上再低溫處理，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)會(huì)不會(huì)生改變？而如果4℃降溫，肯定很慢，這樣又會(huì)發(fā)生時(shí)間依賴性酶活性的喪失。。。
不知大家試驗(yàn)中會(huì)如何處理這個(gè)問題？剛開始做實(shí)驗(yàn)，請多加指教~·~

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1樓 2011-11-29 19:21:52

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西瓜

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hellen1987(金幣+5): 恩謝謝馬上檢測確實(shí)不容易現(xiàn)在我是覺得放在化了的冰水里可能比較現(xiàn)實(shí) 2011-12-01 09:06:24

個(gè)人認(rèn)為，如果可能，最好高溫處理之后馬上檢測。
本人外行，權(quán)當(dāng)頂貼吧~

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2樓2011-11-29 23:33:45

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神以靈

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西瓜(金幣+1): good 2011-11-30 04:08:43
hellen1987(金幣+5): 是應(yīng)該再看一些影響蛋白質(zhì)構(gòu)象相關(guān)的文獻(xiàn) 謝謝了！ 2011-12-01 09:08:12

測定溫度一定要室溫嗎
如果一定要室溫
那兩種都試一下看看結(jié)果差多少
我也沒搞過
不敢說
你可以查一下文獻(xiàn)
看看冰水浴是否真的會(huì)產(chǎn)生你說的那種負(fù)面效果
因?yàn)椴煌拿笐?yīng)該不一樣

[ Last edited by 神以靈 on 2011-11-29 at 23:58 ]

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3樓2011-11-29 23:57:11

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hellen1987(金幣+10): 恩謝謝很有啟發(fā) 2011-12-06 08:45:58

立即冰水浴吧,放冰箱的做法,別人重復(fù)不了,誰知道你的冰箱距離水浴鍋多遠(yuǎn)!精確是相對而言的,能精確的是放到80度水浴的時(shí)間.放入前是在冰浴還是室溫,可以寫.達(dá)到80度是需要時(shí)間的,跟樣品的溫度,體積和試管的材質(zhì)厚度有一定影響.試驗(yàn)的做法和描述只要更方便別人理解和重復(fù)你的試驗(yàn)就可以了.

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5樓2011-12-03 09:38:55

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補(bǔ)充一下,因?yàn)橐獪y構(gòu)象變化,這方面不懂.建議仔細(xì)閱讀參考文獻(xiàn),看明白別人怎么做,在充分理解的情況下,然后自己照著做,條件不具備的,才適當(dāng)?shù)男薷?

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6樓2011-12-06 09:34:50

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shuangzi8761

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西瓜(金幣+1): 鼓勵(lì)交流 2011-12-07 18:49:33

建議直接冰浴之前也有冰浴還是冰箱的困惑不過你看任何的使用指南沒有說放冰箱的吧都是冰浴。。。。。。

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7樓2011-12-06 09:49:59

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引用回帖:

5樓: Originally posted by 547star at 2011-12-03 09:38:55:
立即冰水浴吧,放冰箱的做法,別人重復(fù)不了,誰知道你的冰箱距離水浴鍋多遠(yuǎn)!精確是相對而言的,能精確的是放到80度水浴的時(shí)間.放入前是在冰浴還是室溫,可以寫.達(dá)到80度是需要時(shí)間的,跟樣品的溫度,體積和試管的材質(zhì)厚度 ...

恩后來同學(xué)講了一句話很對低溫變性是可以恢復(fù)的高溫不可以所以冰浴應(yīng)該是最佳選擇另外六樓講的也很對很多試劑盒的使用說明里關(guān)于酶的液都會(huì)直接冰浴

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8樓2011-12-07 08:39:00

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shijx4樓

2011-12-02 22:17 回復(fù)

wanhscn: 對于求助帖!不可純表情回帖! 2011-12-02 22:20:46
wanhscn(金幣+2): 不管怎么樣,先鼓勵(lì)新蟲友回帖!下次注意,謝謝合作! 2011-12-02 22:21:59

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