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[交流] 酶在80℃熱水處理變性的問(wèn)題

我是研究在某一溫度下蛋白質(zhì)變性程度以及空間結(jié)構(gòu)的變化問(wèn)題，酶在80℃熱水中處理5min，時(shí)間要求很精確，處理結(jié)束是應(yīng)該馬上放冰浴中？還是放4℃冰箱中降溫？
想要有速度的話(huà)肯定是冰浴快，但是在高溫下馬上再低溫處理，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)會(huì)不會(huì)生改變？而如果4℃降溫，肯定很慢，這樣又會(huì)發(fā)生時(shí)間依賴(lài)性酶活性的喪失。。。
不知大家試驗(yàn)中會(huì)如何處理這個(gè)問(wèn)題？剛開(kāi)始做實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)多加指教~·~

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1樓 2011-11-29 19:21:52

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西瓜

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hellen1987(金幣+5): 恩謝謝馬上檢測(cè)確實(shí)不容易現(xiàn)在我是覺(jué)得放在化了的冰水里可能比較現(xiàn)實(shí) 2011-12-01 09:06:24

個(gè)人認(rèn)為，如果可能，最好高溫處理之后馬上檢測(cè)。
本人外行，權(quán)當(dāng)頂貼吧~

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2樓2011-11-29 23:33:45

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神以靈

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西瓜(金幣+1): good 2011-11-30 04:08:43
hellen1987(金幣+5): 是應(yīng)該再看一些影響蛋白質(zhì)構(gòu)象相關(guān)的文獻(xiàn) 謝謝了！ 2011-12-01 09:08:12

測(cè)定溫度一定要室溫嗎
如果一定要室溫
那兩種都試一下看看結(jié)果差多少
我也沒(méi)搞過(guò)
不敢說(shuō)
你可以查一下文獻(xiàn)
看看冰水浴是否真的會(huì)產(chǎn)生你說(shuō)的那種負(fù)面效果
因?yàn)椴煌拿笐?yīng)該不一樣

[ Last edited by 神以靈 on 2011-11-29 at 23:58 ]

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3樓2011-11-29 23:57:11

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hellen1987(金幣+10): 恩謝謝很有啟發(fā) 2011-12-06 08:45:58

立即冰水浴吧,放冰箱的做法,別人重復(fù)不了,誰(shuí)知道你的冰箱距離水浴鍋多遠(yuǎn)!精確是相對(duì)而言的,能精確的是放到80度水浴的時(shí)間.放入前是在冰浴還是室溫,可以寫(xiě).達(dá)到80度是需要時(shí)間的,跟樣品的溫度,體積和試管的材質(zhì)厚度有一定影響.試驗(yàn)的做法和描述只要更方便別人理解和重復(fù)你的試驗(yàn)就可以了.

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5樓2011-12-03 09:38:55

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補(bǔ)充一下,因?yàn)橐獪y(cè)構(gòu)象變化,這方面不懂.建議仔細(xì)閱讀參考文獻(xiàn),看明白別人怎么做,在充分理解的情況下,然后自己照著做,條件不具備的,才適當(dāng)?shù)男薷?

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6樓2011-12-06 09:34:50

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shuangzi8761

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西瓜(金幣+1): 鼓勵(lì)交流 2011-12-07 18:49:33

建議直接冰浴之前也有冰浴還是冰箱的困惑不過(guò)你看任何的使用指南沒(méi)有說(shuō)放冰箱的吧都是冰浴。。。。。。

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7樓2011-12-06 09:49:59

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引用回帖:

5樓: Originally posted by 547star at 2011-12-03 09:38:55:
立即冰水浴吧,放冰箱的做法,別人重復(fù)不了,誰(shuí)知道你的冰箱距離水浴鍋多遠(yuǎn)!精確是相對(duì)而言的,能精確的是放到80度水浴的時(shí)間.放入前是在冰浴還是室溫,可以寫(xiě).達(dá)到80度是需要時(shí)間的,跟樣品的溫度,體積和試管的材質(zhì)厚度 ...

恩后來(lái) 同學(xué)講了一句話(huà) 很對(duì) 低溫變性是可以恢復(fù)的高溫不可以所以冰浴應(yīng)該是最佳選擇另外六樓講的也很對(duì) 很多試劑盒的使用說(shuō)明里關(guān)于酶的液都會(huì)直接冰浴

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8樓2011-12-07 08:39:00

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簡(jiǎn)單回復(fù)

shijx4樓

2011-12-02 22:17 回復(fù)

wanhscn: 對(duì)于求助帖!不可純表情回帖! 2011-12-02 22:20:46
wanhscn(金幣+2): 不管怎么樣,先鼓勵(lì)新蟲(chóng)友回帖!下次注意,謝謝合作! 2011-12-02 22:21:59

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