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UVP質(zhì)粒凝膠定量分析
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我們實驗室的凝膠成像分析系統(tǒng)用的UVP的，每次跑完電泳，師兄師姐都用肉眼對比一下亮度，通過Marker判斷質(zhì)粒有多少ng。我覺得肉眼判斷不準，想通過UVP自帶的軟件分析得到結(jié)果，于是自己研究了下。 我的marker是TaKaRa公司的Supercoiled DNA Ladder Marker。通過肉眼判斷，我的質(zhì)粒條帶的亮度與marker中最亮的5kbp的條帶相同，即150ng。用軟件得到的濃度卻是50ng。不知道為什么是這個結(jié)果。 可能是我用軟件用的不對？我們通常不都是看有多少ng嗎？軟件的定量里用的是濃度，那應該怎么輸入和計算��？直接按ng輸，得到的結(jié)果也認為是多少ng不行嗎？ 還有就是北京校正，好像是有好幾種方式，比如Rolling Disc,讓輸入數(shù)值，我輸了6，這時峰比較尖銳，我也不懂，以為這種情況比較好，應該怎么樣設(shè)數(shù)值��？是不是這個問題也影響了實驗結(jié)果��？ 希望高人不吝賜教，不勝感激！或者相關(guān)的中文教程的資源，能夠提供一下？謝謝！ |
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2樓2011-11-30 09:59:39
3樓2011-11-30 12:52:31
4樓2011-11-30 15:06:25
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