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UVP質(zhì)粒凝膠定量分析
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我們實驗室的凝膠成像分析系統(tǒng)用的UVP的，每次跑完電泳，師兄師姐都用肉眼對比一下亮度，通過Marker判斷質(zhì)粒有多少ng。我覺得肉眼判斷不準(zhǔn)，想通過UVP自帶的軟件分析得到結(jié)果，于是自己研究了下。 我的marker是TaKaRa公司的Supercoiled DNA Ladder Marker。通過肉眼判斷，我的質(zhì)粒條帶的亮度與marker中最亮的5kbp的條帶相同，即150ng。用軟件得到的濃度卻是50ng。不知道為什么是這個結(jié)果。 可能是我用軟件用的不對？我們通常不都是看有多少ng嗎？軟件的定量里用的是濃度，那應(yīng)該怎么輸入和計算啊？直接按ng輸，得到的結(jié)果也認(rèn)為是多少ng不行嗎？ 還有就是北京校正，好像是有好幾種方式，比如Rolling Disc,讓輸入數(shù)值，我輸了6，這時峰比較尖銳，我也不懂，以為這種情況比較好，應(yīng)該怎么樣設(shè)數(shù)值��？是不是這個問題也影響了實驗結(jié)果�。� 希望高人不吝賜教，不勝感激！或者相關(guān)的中文教程的資源，能夠提供一下？謝謝！ |
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2樓2011-11-30 09:59:39
space3063
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3324
- 帖子: 1567
- 在線: 122.5小時
- 蟲號: 697430
- 注冊: 2009-02-06
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2011-11-30 12:52:31
4樓2011-11-30 15:06:25
5樓2011-11-30 21:11:31
6樓2011-12-01 08:31:20
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