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造血干細(xì)胞銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
連接失敗,求解
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載體:4.5kb,酶切前nano drop測(cè)250ng/ul,酶切后割膠回收nano drop測(cè)10ng/ul, 片段:引物復(fù)性所得,電泳檢測(cè)純度良好無雜帶 連接體系: T4buffer:1 T4ligase :1 載體:3 片段:1 ddH2O:4 total:10 快速連接22C,1hour,后邊是轉(zhuǎn)化步驟，今天早上看得板子上沒有菌落，電泳檢測(cè)了下，連接產(chǎn)物，什么都沒有！咋個(gè)回事啊？我的片段不是很長(zhǎng)，應(yīng)該很好連的啊，但是問題是，連接完了什么都沒有了... [ Last edited by 1949stone on 2011-12-16 at 12:20 ] |
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