 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2369 | 回復(fù): 9 | ||
tuodecai鐵桿木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
求體外轉(zhuǎn)錄 已有2人參與
|
|
我這體外轉(zhuǎn)錄斷斷續(xù)續(xù)做了近一年了，已經(jīng)用了兩個試劑盒，第一個是ambion公司的mMESSAGE mMACHINE Kit High Yield Capped RNA Transcription Kit，剛買了第二個試劑盒（Promega公司的RiboMAX Large Scale RNA Production Systems—SP6 and T7），做了幾次仍未成功，但每次試劑盒里的對照都能轉(zhuǎn)成功的。我的實驗是要轉(zhuǎn)錄出一條11kb的病毒基因組RNA，用帶T7啟動子的PCR的產(chǎn)物作為模板進行體外轉(zhuǎn)錄。我覺得體外轉(zhuǎn)錄的模板應(yīng)該比較關(guān)鍵，不知是不需要做什么特殊的處理？也許是因為片段較大，我每次PCR產(chǎn)物回收后的濃度(50ng/ul)遠達不到試劑盒里的濃度（第一個kit要求1ug/ul，第二個要求5-10ug的性線化模板量），而我也用乙醇沉淀后，效果同樣不理想。請有體外轉(zhuǎn)錄經(jīng)驗的高手支招，多多交流下下您們的經(jīng)驗，看看做體外轉(zhuǎn)錄最需要注意的是哪些方面。不盡感激！ [ Last edited by 1949stone on 2011-12-20 at 13:28 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有57人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- RNA電泳
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 關(guān)于轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控的下游基因
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 反轉(zhuǎn)錄高手進來~~
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 反轉(zhuǎn)錄
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 它怎么就反轉(zhuǎn)錄不出來，求教
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合點的PWM
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】請問高手：轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)和翻譯后調(diào)節(jié)的區(qū)別
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】反轉(zhuǎn)錄過程中的問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】反轉(zhuǎn)錄時該選用oligo dT還是 隨機6引物？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【分享】連接miRNA到胚胎干細(xì)胞的核心轉(zhuǎn)錄調(diào)控環(huán)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】體外轉(zhuǎn)錄11kb的片段用哪個公司的試劑比較好？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】用SMART技術(shù)得到一個基因的5‘ RACE后，是不是就知道該基因的轉(zhuǎn)錄起始位
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于體外轉(zhuǎn)錄的模板
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】跪求反轉(zhuǎn)錄失敗的原因
已經(jīng)有16人回復(fù)
lilyjimei
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1072.8
- 帖子: 274
- 在線: 39.8小時
- 蟲號: 1085748
- 注冊: 2010-08-31
- 專業(yè): 水產(chǎn)生物遺傳育種學(xué)
2樓2012-06-04 21:57:43
tuodecai
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 18084.5
- 散金: 1015
- 紅花: 8
- 帖子: 2466
- 在線: 487.5小時
- 蟲號: 803416
- 注冊: 2009-07-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2012-06-06 00:06:29
lilyjimei
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1072.8
- 帖子: 274
- 在線: 39.8小時
- 蟲號: 1085748
- 注冊: 2010-08-31
- 專業(yè): 水產(chǎn)生物遺傳育種學(xué)
4樓2012-06-23 22:59:27
fuweilin2013
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 27.8
- 帖子: 10
- 在線: 12.2小時
- 蟲號: 2569423
- 注冊: 2013-07-28
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2013-10-27 21:36:43
dadadalin
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 105.3
- 帖子: 25
- 在線: 12.1小時
- 蟲號: 6849699
- 注冊: 2017-06-26
- 專業(yè): 病毒、病毒感染與宿主免疫
6樓2019-12-01 20:27:28
dadadalin
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 105.3
- 帖子: 25
- 在線: 12.1小時
- 蟲號: 6849699
- 注冊: 2017-06-26
- 專業(yè): 病毒、病毒感染與宿主免疫
7樓2019-12-01 20:27:50
tuodecai
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 18084.5
- 散金: 1015
- 紅花: 8
- 帖子: 2466
- 在線: 487.5小時
- 蟲號: 803416
- 注冊: 2009-07-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
8樓2019-12-02 07:02:54
dadadalin
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 105.3
- 帖子: 25
- 在線: 12.1小時
- 蟲號: 6849699
- 注冊: 2017-06-26
- 專業(yè): 病毒、病毒感染與宿主免疫
9樓2019-12-02 09:27:54
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
10樓2020-11-23 10:47:53
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 tuodecai 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +8 | z1z2z3879 2026-03-16 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0703化學(xué)336分求調(diào)劑 +4 | zbzihdhd 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩調(diào)劑 +5 | 204818@lcx 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +9 | 負(fù)心者當(dāng)誅 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八旬速覽 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 267一志愿南京工業(yè)大學(xué)0817化工求調(diào)劑 +6 | SUICHILD 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿，福州大學(xué)材料專碩339分求調(diào)劑 +3 | 木子momo青爭 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 時間點 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 080500，材料學(xué)碩302分求調(diào)劑學(xué)校 +4 | 初識可樂 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程327求調(diào)劑 +3 | xiaohe12w 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | ?醬給調(diào)劑跪了 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工301求調(diào)劑 +5 | 奕束光 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | S.H1 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | ADT 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-12 | 4/200 |
|