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[求助]
大腸桿菌菌落形態(tài)請教
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各位好，本人首次做微生物培養(yǎng)實驗，遇到問題，煩請大家解答~ 從其他實驗室拿到純大腸桿菌菌種（據(jù)說是純E.Coli菌種）之后，我將其使用肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)后，用無菌水稀釋，作為實驗使用的大腸桿菌菌液。 之后為檢測菌液中大腸桿菌濃度，于是使用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)菌液水樣（1mL菌液倒平板）。培養(yǎng)24h后長出如圖片的所示菌落。 請各位忽略中間凸起的幾塊塊瓊脂，只看菌落。 菌落有些是長在在瓊脂表面的，成圓塊狀，明顯，如圖左下方的菌落；而更有一部分是生長在在瓊脂層內(nèi)的，更小，呈小芝麻般的粒狀，布滿了整個瓊脂層。。。 請問該兩種群落是否代表了兩種細(xì)菌？哪種才是大腸桿菌呢？還是兩種都是？請有經(jīng)驗的蟲友回應(yīng)，謝謝了~ 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)產(chǎn)品 [ Last edited by stvmin on 2011-12-29 at 12:23 ] |
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stvmin6樓2011-12-29 14:41:58
2樓2011-12-29 12:26:15
【答案】應(yīng)助回帖
| 大腸桿菌的菌落比較濕潤，看著像，你可以做一下革蘭氏染色，陰性的話基于菌種的來源基本確定是大腸。如果想確定只能做生化試驗了。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
7樓2011-12-29 14:42:36
zhaohp85
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
stvmin(金幣+10): 嗯嗯，謝謝你呢~ 2011-12-30 20:51:37
zhang8826857(金幣+5): good 2011-12-30 21:18:23
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
stvmin(金幣+10): 嗯嗯，謝謝你呢~ 2011-12-30 20:51:37
zhang8826857(金幣+5): good 2011-12-30 21:18:23
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僅從形態(tài)很難判斷是否為同一株菌的，除非一些表型特征差異特別大，比如一個產(chǎn)色素，另一個菌落不產(chǎn)色素等。要想鑒別是否為同一菌，用大腸桿菌的特征引物去擴(kuò)增檢測就好了，比如你的大腸桿菌具有哪個抗性基因，用那個抗性基因的引物去驗證，一般情況下不會有那么湊巧，正好污染菌也具有相同的抗性。如果要想準(zhǔn)確鑒定是否為大腸桿菌，除了PCR擴(kuò)增16S外，還需要一些基本的生理生化特性加以判別，16S基因序列不能100%保證區(qū)別到種，不過鑒定到屬是沒問題的。 PS:樓主的細(xì)菌計數(shù)方法很不科學(xué)，是否可以改進(jìn)下呢？綜合樓上幾位所說，平板計數(shù)法只有在一個平板上的菌落數(shù)在30~300個才被廣泛接受認(rèn)為是準(zhǔn)確的。如果大概的數(shù)量可以用OD值來判斷，測定一下吸光值，然后就能估計對應(yīng)的數(shù)量就出來了。僅供參考~~ |
11樓2011-12-30 15:50:17
20樓2012-01-10 09:24:49
cuijinmiss
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3樓2011-12-29 13:02:39
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9樓2011-12-29 16:41:20
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