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fxb66木蟲 (正式寫手)
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[求助]
培養(yǎng)皿雜菌去除
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首先感謝各位的關(guān)注 。本人初涉微生物領(lǐng)域，采用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行水稻紋枯菌培養(yǎng)。第一次培養(yǎng)成功（和他人論文上紋枯菌特征對(duì)照），后多次試驗(yàn)均培養(yǎng)失敗。水稻紋枯菌28度大概培養(yǎng)72小時(shí)才會(huì)長(zhǎng)成菌落，現(xiàn)在是在30個(gè)小時(shí)左右培養(yǎng)皿內(nèi)就會(huì)出現(xiàn)一種半液態(tài)粘稠狀的雜菌 ，圖片附在最后，請(qǐng)各位指點(diǎn)下：1.這是什么雜菌，如何有效杜絕！ 對(duì)超凈工作臺(tái)、培養(yǎng)箱都進(jìn)行了消毒，操作過程非常謹(jǐn)慎，自認(rèn)為沒有什么失誤！培養(yǎng)皿及其他用到的操作工具都是121度高溫蒸汽滅30分鐘，仍然出現(xiàn)上述問題（所用培養(yǎng)基為最普通的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)固體培養(yǎng)基）。 2.培養(yǎng)過程中，導(dǎo)致雜菌出現(xiàn)最有可能的環(huán)節(jié)是哪個(gè)？ 敬請(qǐng)各位高人指點(diǎn)！非常感謝�。。�   |
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1.做不接種的空培養(yǎng)基平板對(duì)照——如果也有雜菌生長(zhǎng)，考慮操作過程、所用器皿以及培養(yǎng)基染菌；如果孔培養(yǎng)基平板沒有雜菌生長(zhǎng)，則可以基本確定是菌種污染雜菌，考慮分離純化。 2.如果你幾次培養(yǎng)染得雜菌相同，重點(diǎn)考慮菌種污染。 |
6樓2012-01-12 13:36:50
【答案】應(yīng)助回帖
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fxb66(金幣+4): ★★★很有幫助 2012-01-14 08:49:10
| 首先，平板上是看不到你要選擇的菌的，如果是經(jīng)過培養(yǎng)的，那么的種子可能在上一代已經(jīng)是被雜菌污染了；其次，對(duì)于這種菌種的純培養(yǎng)，添加氯霉素是治標(biāo)不治本的，抑制生長(zhǎng)不是殺死，染菌問題得不到解決，但是可以輔助確定你原代中是否有你想要的菌株，后續(xù)仍然需要分離。分離的方法是三區(qū)劃線，建議找參考書稍微看一下，不好說清楚，其實(shí)很簡(jiǎn)單。另外，培養(yǎng)皿盡量干滅，有水的話容易染菌。 |
7樓2012-01-12 13:49:36
njuzhangxin
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8樓2012-01-13 14:10:50
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朋友，能幫下忙嗎!有水稻紋枯菌培養(yǎng)出來的菌絲圖片嗎，發(fā)幾張好嗎！我的郵箱fxb9510@yahoo.cn,非常感謝！苦惱，身邊完全沒有人指導(dǎo)啊，張出來的菌是不是都不知道��！我現(xiàn)在長(zhǎng)出的菌絲是乳白色的，菌核大概80小時(shí)左右是黑中泛綠色，不知道對(duì)不對(duì)啊？能指點(diǎn)下嗎？ |
9樓2012-01-14 16:27:26
njuzhangxin
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Thanatephorus cucumeris (Frank) Donk.稱瓜亡革菌，屬擔(dān)子菌亞門真菌。無性態(tài)Rhizoctonia solani Kühn稱立枯絲核菌，屬半知菌亞門真菌。致病的主要菌絲融合群是AG-1占95%以上，其次是AG-4和AG-Bb(雙核線核菌)。從菌絲生長(zhǎng)速度和菌核開始產(chǎn)生扎需時(shí)間來看，R.solani AG-1和AG-4較快，而雙核絲核菌AG-Bb較慢。在PDA上23℃條件下AG-1形成菌核需時(shí)3天。菌核深褐色圓形或不規(guī)則形，較緊密。菌落色澤淺褐至深褐色；AG-4菌落淺灰褐色，菌核形成需3-4天，褐色，不規(guī)則形，較扁平，疏松，相互聚集；AG-Bb菌落灰褐色，菌核形成需3-4天，灰褐色，圓形或近圓形，大小較一致，一般生于氣生菌絲叢中。 選真菌通用引物，跑個(gè)pcr，測(cè)序，比對(duì)一下，就知道是不是紋枯菌了。 |
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fxb6610樓2012-01-15 05:40:33
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