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bffgbgff新蟲 (小有名氣)
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[求助]
溶解曲線的問題
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我做的realtime-PCR，1-4號模板P其他的基因都很好，唯獨(dú)這個(gè)基因溶解曲線不好，相同的引物在不同的模板間溶解曲線不一樣。是為什么呢？見圖。 不知道哪位前輩遇到過這個(gè)問題！ |
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海闊天空8158
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+6, MolEPI+1): 很熱心幫忙，授予EPI！ 2012-01-18 19:07:48
西瓜(金幣+6, MolEPI+1): 很熱心幫忙，授予EPI！ 2012-01-18 19:07:48
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按照現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)條件和你現(xiàn)在的描述，由于沒有足夠的模板，引物因此沒有經(jīng)過消耗。這樣的話，如果引物能夠形成二聚體的話，會很大比例的形成二聚體。 關(guān)于引物二聚體的形成難易程度，可以在PRIMER PREMIER 5.0中進(jìn)行驗(yàn)證。 或者，可以通過文獻(xiàn)查找的方法，合成比較成熟的引物。 如果時(shí)間允許的話，這些都可以試試。 祝實(shí)驗(yàn)順利。 |
8樓2012-01-16 16:40:52
海闊天空8158
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blackrose8089
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4樓2012-01-15 14:39:55
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