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PCR產(chǎn)物經(jīng)酶切電泳后所得的基因型與測(cè)序結(jié)果不一致，是何原因？該如何處理？
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| PCR產(chǎn)物經(jīng)酶切電泳后所得的基因型與測(cè)序結(jié)果不一致，是何原因？該如何處理？ |
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7樓2012-01-28 11:27:18
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8樓2012-01-28 11:32:08
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜(金幣+5, MolEPI+1): 分析有條有理，連同上一貼一起授予EPI！ 2012-02-08 21:18:53
西瓜(金幣+5, MolEPI+1): 分析有條有理，連同上一貼一起授予EPI！ 2012-02-08 21:18:53
| 懂你意思了，你是說(shuō)本來(lái)是有酶切位點(diǎn)的，現(xiàn)在突變了，位點(diǎn)沒有了，是吧。幾個(gè)問(wèn)題（1）你是怎么突變的？具體是把酶切位點(diǎn)怎么了？不覺得很奇怪么？1,2泳道加起來(lái)就是野生型的大小，你自己用DNAMAN分析下是不是預(yù)期的結(jié)果？（2）把你的酶切重做一遍，膠照亮一點(diǎn)，看看是不是還有隱藏的條帶沒照出來(lái)？這樣的話就能解釋測(cè)序結(jié)果一樣的問(wèn)題了 |
11樓2012-01-29 21:26:28
Charles-glh 
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2樓2012-01-26 21:26:20
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3樓2012-01-27 10:18:30
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4樓2012-01-27 12:36:23
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5樓2012-01-27 14:18:59
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6樓2012-01-27 20:24:09
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜(金幣+4): Good！ 2012-01-29 11:27:11
西瓜(金幣+4): Good！ 2012-01-29 11:27:11
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（1）2,3泳道可能是相同的大小吧？從圖上看也是一樣的。 （2）測(cè)序的結(jié)果是最準(zhǔn)的，所以斷定是你的基因型問(wèn)題 （3）你的基因型是什么方法改變的？要是通過(guò)載體的話，你的載體是什么？如果常見就重做吧，肯定不是測(cè)序問(wèn)題。如果不常見就建議公司你的引物，可能引物的問(wèn)題 （4）和你的原來(lái)沒有改變過(guò)的野生型做對(duì)比，告訴我們結(jié)果 （5）請(qǐng)給出MARKER，酶切圖要有的 |
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hotmail9樓2012-01-28 21:01:05
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10樓2012-01-29 19:30:42
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