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syn1985木蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助鏈霉菌基因敲除同源重組的方法
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我之前用in frame deletion方法構(gòu)建了基因敲除載體 然后將載體用結(jié)合轉(zhuǎn)移的方法轉(zhuǎn)到鏈霉菌中去了,長(zhǎng)出了很多接合子,但是我做傳代后挑10個(gè)克隆 用PCR鑒定全為野生型,我也抑郁,不知道怎么辦 我想重新構(gòu)建敲除載體,在中間加上抗生素的篩選標(biāo)記,但是又擔(dān)心抗生素加進(jìn)去后會(huì)產(chǎn)生極性效應(yīng),所以很苦惱,老板催的緊,做不出來(lái)就被罵,很抑郁, ![]() 大家有沒(méi)有什么好的建議啊 我該怎么辦啊 |
銅蟲 (初入文壇)

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