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jessica2010新蟲(chóng) (小有名氣)
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如何獲得一個(gè)酶的基因
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| 我自己分離了一株菌，純化得到了一個(gè)酶，請(qǐng)問(wèn)各分子生物學(xué)高手，如何獲得這個(gè)酶的基因？ |
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lxj341401
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西瓜(金幣+4, MolEPI+1, 專(zhuān)家考核): Good！ 2012-02-22 18:45:34
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純化得到酶后： （1）如果是來(lái)源于原核生物進(jìn)行N/C端氨基酸測(cè)序，然后根據(jù)兩端的氨基酸序列設(shè)計(jì)兼并引物，PCR擴(kuò)增獲得編碼基因。 （2）如果是來(lái)源于真核生物進(jìn)行N端氨基酸測(cè)序即可，然后根據(jù)N端的氨基酸序列設(shè)計(jì)一條兼并引物，polyA尾巴設(shè)計(jì)另外一條引物，RTPCR擴(kuò)增獲得編碼基因。 |
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jessica20103樓2012-02-22 09:40:39
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