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[求助]
化合物分離純化的問題
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由于本課題組無人做微生物次生代謝產(chǎn)物方面的實(shí)驗(yàn)，所以特向諸位大俠求助： 1、第一個(gè)實(shí)驗(yàn)是關(guān)于分代謝產(chǎn)物的，我現(xiàn)在發(fā)酵了104L，得到乙酸乙酯粗提物 僅13克，其中含有少量的氯化鈉，由于樣品太少，而且自己對(duì)這塊也是新手， 準(zhǔn)備按實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書上，進(jìn)行硅膠柱分離，走傳統(tǒng)方法。目標(biāo)是把該菌株產(chǎn)生的 次生代謝產(chǎn)物盡可能多的都分離到，得到結(jié)構(gòu)。 問題在于： 1）實(shí)驗(yàn)室目前實(shí)驗(yàn)設(shè)備不足，僅有三根柱子，導(dǎo)師讓我看看缺什么，再買。。。我沒有經(jīng)驗(yàn)，希望各位 支支招？ 2）和其他學(xué)校以同學(xué)討論，她說，樣品少的話，可以先上大孔樹脂分段，然后液相看出峰條件，再用制備型液相收集樣品，這樣損失較少。不知道是否可行？ 2、另一個(gè)實(shí)驗(yàn)是我固態(tài)發(fā)酵做的，粗品得到的也很少，是比較兩中發(fā)酵方法的化合物產(chǎn)生情況不同，我想問問，如果不分單體的話，有沒有好的辦法能夠說明化合物變化啊。 耐心看完，各位辛苦了，謝謝各位了！ |
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xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-02-24 13:01:47
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無論如何，如果有HPLC的話，先把得到的粗物質(zhì)分析一下。 你發(fā)酵的是真菌吧，其實(shí)粗物質(zhì)的量不算少了。別人有發(fā)酵得到幾g的。你的13g不少了。 我沒有用過大孔樹脂分過段，不過薄層層析柱色譜（短而且粗的硅膠柱）倒是很少的方法。 砍完段后，再用HPLC分析，能制備就直接制備，不能制備的在作進(jìn)一步的分離。 樓主，核磁解析結(jié)構(gòu)（平面和立體）是重點(diǎn)。 祝你好運(yùn)。 |
m2hy2樓2012-02-24 09:49:58
3樓2012-02-24 12:35:21
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-02-24 13:01:54
m2hy(金幣+5): ★★★很有幫助 謝謝交流！ 2012-02-24 18:26:23
xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-02-24 13:01:54
m2hy(金幣+5): ★★★很有幫助 謝謝交流！ 2012-02-24 18:26:23
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13g應(yīng)該不算少的，呵呵 不知道lz里面大概有多少個(gè)組分？以前做十幾個(gè)發(fā)酵產(chǎn)物組分的時(shí)候有用過大孔樹脂分段，梯度洗脫就能分段了，HPLC可以檢測分段效果，然后在過硅膠柱粗分，要是組分多而且極性相近的話建議lz你買細(xì)的硅膠，耗時(shí)一點(diǎn)沒關(guān)系， 如果不需要分離單體的話HPLC不是就可以看出相對(duì)變化么？或者你做個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線神馬的也可以看絕對(duì)的啊，要是有條件做個(gè)LC-MS就更好了呢！我看別人探索發(fā)酵條件一般就用HPLC就夠了呢。。。 |
4樓2012-02-24 12:51:23
5樓2012-02-24 18:31:03
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9樓2015-12-25 16:45:14
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10樓2015-12-27 01:40:37
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