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[求助]
化合物分離純化的問題
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由于本課題組無人做微生物次生代謝產(chǎn)物方面的實驗,所以特向諸位大俠求助: 1、第一個實驗是關于分代謝產(chǎn)物的,我現(xiàn)在發(fā)酵了104L,得到乙酸乙酯粗提物 僅13克,其中含有少量的氯化鈉,由于樣品太少,而且自己對這塊也是新手, 準備按實驗指導書上,進行硅膠柱分離,走傳統(tǒng)方法。目標是把該菌株產(chǎn)生的 次生代謝產(chǎn)物盡可能多的都分離到,得到結構。 問題在于: 1)實驗室目前實驗設備不足,僅有三根柱子,導師讓我看看缺什么,再買。。。我沒有經(jīng)驗,希望各位 支支招? 2)和其他學校以同學討論,她說,樣品少的話,可以先上大孔樹脂分段,然后液相看出峰條件,再用制備型液相收集樣品,這樣損失較少。不知道是否可行? 2、另一個實驗是我固態(tài)發(fā)酵做的,粗品得到的也很少,是比較兩中發(fā)酵方法的化合物產(chǎn)生情況不同,我想問問,如果不分單體的話,有沒有好的辦法能夠說明化合物變化啊。 耐心看完,各位辛苦了,謝謝各位了! |

木蟲 (著名寫手)


木蟲 (小有名氣)
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13g應該不算少的,呵呵 不知道lz里面大概有多少個組分?以前做十幾個發(fā)酵產(chǎn)物組分的時候有用過大孔樹脂分段,梯度洗脫就能分段了,HPLC可以檢測分段效果,然后在過硅膠柱粗分,要是組分多而且極性相近的話建議lz你買細的硅膠,耗時一點沒關系, 如果不需要分離單體的話HPLC不是就可以看出相對變化么?或者你做個標準曲線神馬的也可以看絕對的啊,要是有條件做個LC-MS就更好了呢!我看別人探索發(fā)酵條件一般就用HPLC就夠了呢。。。 |

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