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smilenini木蟲 (初入文壇)
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[求助]
急問!不同引物的PCR反應(yīng)體系必須相同嗎?
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請教各位,在做逆轉(zhuǎn)錄PCR時(shí),當(dāng)需要擴(kuò)增的引物有很多對時(shí),必須用同一個(gè)擴(kuò)增體系來擴(kuò)增嗎?如果有的引物在此體系擴(kuò)增不好,反復(fù)試退火溫度都不行時(shí),能換體系嗎? 跟其他產(chǎn)物還有可比性嗎? 另外,當(dāng)同一組同一個(gè)組織部位擴(kuò)增產(chǎn)物種類比較多時(shí),電泳時(shí)每個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物都要跟內(nèi)參嗎?還是將內(nèi)參及其他目的基因在不同的膠上電泳出,最后不同的目的基因全跟同一個(gè)內(nèi)參比較?如果有的引物雜帶較多,需要做touchdown PCR,而有的引物直接PCR就可以,那二者還有可比性么? 不知道大家明白我的意思沒,表述有些混亂,請大家不吝賜教!! |
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