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若然飛翔新蟲 (初入文壇)
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[求助]
利用CHO進行分泌表達
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| Sample Text 我想利用CHO細胞分泌表達一個膜蛋白，從上游構(gòu)建開始，我該如何選擇可以在CHO中進行高效表達的載體?如果使用pCDNA3.1,啟動子，增強子我該如何處理？如何選擇信號肽�。縿傞_始接觸，有太多不明白的地方了，請大家?guī)蛶兔?img src="https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/dragon/19.gif" align="absmiddle" border="0"> |
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 【分子生物】EPI帖 |
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【答案】應助回帖
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西瓜: 金幣+5, MolEPI+1, Good! 2012-03-20 11:54:03
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首先，完整的膜蛋白是不可能分泌表達的（你是指將膜蛋白表達在CHO細胞的細胞膜上吧？）。既然是膜蛋白，就用它自身的信號肽就好了。 表達時載體的確很重要，但也得分情況的: 如果你是想構(gòu)建穩(wěn)定的細胞株，那么你可以考慮用pcDNA3.1，也可以考慮用invitrogen的FlP-IN系統(tǒng)，更容易獲得高表達細胞株； 如果是做瞬時表達，那么建議你用invitrogen的MembranePro™ Functional Protein Expression (FPE) System。 |
2樓2012-03-19 21:36:01
若然飛翔
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3樓2012-03-20 08:41:10
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4樓2012-03-21 08:01:57
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