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Amily1002木蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)定，急求意見！
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正在做的藥，需要做尾靜脈注射，大概濃度范圍是5到50000ng，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍該如何確定？ 有人建議不能做這么寬的范圍，但是又不知道再怎么往下做了 |
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3樓2012-03-23 14:55:19
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270: 金幣+2, 3Q 2012-03-23 21:12:54
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xiaoxiao270: 金幣+2, 3Q 2012-03-23 21:12:54
| 你要是做兩條標(biāo)曲差不多就是兩套方法學(xué)了。血漿稀釋準(zhǔn)確度的話你可以這樣做，比較浪費(fèi)血漿的做法是：（假如你原來方法是1mL血漿，加50微升QC樣品）配制QC高標(biāo)準(zhǔn)溶液以及2倍QC高濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，取1mL血漿，加50微升QC高標(biāo)準(zhǔn)溶液或者2倍QC高標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻后取出525微升，加入0.5mL空白血漿，補(bǔ)加25微升溶解標(biāo)準(zhǔn)溶液的溶劑，其它按照你血漿樣品處理方法處理，這樣你的兩個(gè)濃度都被稀釋了2倍，也就都在你的曲線范圍內(nèi)了，但是這樣也只是把你的標(biāo)曲擴(kuò)大到2倍QC高的濃度。不浪費(fèi)的做法就是1mL血漿加25微升標(biāo)準(zhǔn)溶液，補(bǔ)加25微升甲醇，其它同法處理了。實(shí)際生物樣本做的時(shí)候就取一半的血漿，補(bǔ)加一半空白血漿，其它同你血漿樣品處理方法了。 |
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Amily10028樓2012-03-23 17:38:39
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4樓2012-03-23 15:12:20
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+2, 說的很詳細(xì)~~~ 2012-03-23 16:31:38
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豆哥: 金幣+2, 說的很詳細(xì)~~~ 2012-03-23 16:31:38
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把握一個(gè)原則，串級(jí)質(zhì)譜可以改成單級(jí)質(zhì)譜模式用，測(cè)定的濃度可以高些，一般串級(jí)質(zhì)譜進(jìn)樣量最好不過微克級(jí)別，單級(jí)的模式可以擴(kuò)大十倍。 另外做個(gè)血漿樣品的稀釋準(zhǔn)確度，對(duì)于個(gè)別較高的點(diǎn)可以稀釋測(cè)定。看你的范圍這么寬泛，知道藥物在體內(nèi)消除應(yīng)該很快，指導(dǎo)原則要求不一定非要藥代動(dòng)力學(xué)考察到那么低的濃度，倒是可以做到Cmax的 1/10～1/20，反映的一些參數(shù)就已經(jīng)比較有意義了。 關(guān)于做兩條標(biāo)線的情況，也可以，但是結(jié)合實(shí)驗(yàn)室情況，不要給串級(jí)質(zhì)譜強(qiáng)行進(jìn)大濃度的，另外設(shè)計(jì)的兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線之間必須有交叉點(diǎn)，例如5～1000，500～50000，考察質(zhì)控點(diǎn)的時(shí)候設(shè)計(jì)一個(gè)800，上下都能用，考察兩個(gè)標(biāo)線。 |
5樓2012-03-23 16:23:42
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7樓2012-03-23 17:14:22
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9樓2012-03-26 18:33:22
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10樓2012-03-26 19:32:34
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