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XLJ海闊天空

金蟲(chóng) (小有名氣)

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[交流] 做農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的請(qǐng)進(jìn)

各位大俠好，關(guān)于抗生素濃度的篩選請(qǐng)教一下：

農(nóng)桿菌侵染后，經(jīng)過(guò)共培養(yǎng)一段時(shí)間后，需要將外植體轉(zhuǎn)移到抑菌培養(yǎng)基上來(lái)抑制多余農(nóng)桿菌的生長(zhǎng)，需要對(duì)所加抗生素的濃度進(jìn)行篩選。不知道各位大俠都是用的什么方法來(lái)篩選的？
看文獻(xiàn)有的是用測(cè)OD值的方式來(lái)看不同濃度的抗生素的抑菌效果？你是用這種方法嗎？這樣可行嗎？你具體是怎么操作的啊？
還有一種是外植體侵染共培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)到含不同濃度抗生素的培養(yǎng)基上來(lái)看其抑菌效果，自己感覺(jué)好像這個(gè)比前一個(gè)靠譜。
你使用的什么方法�。肯Ｍ湍憬涣饕幌拢x謝！

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1樓 2012-04-07 16:22:24

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bbzj

新蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

8樓: Originally posted by XLJ海闊天空 at 2012-04-09 16:29:37:
那你在真正去做轉(zhuǎn)化的時(shí)候也是這樣讓無(wú)菌風(fēng)將其表面菌液吹干后就轉(zhuǎn)到抑菌的培養(yǎng)i基上，不用無(wú)菌水什么的清洗外植體嗎？不知道你轉(zhuǎn)化的情況怎么樣？

不好意思,忘記了,還是有用無(wú)菌水洗四次然后才吹干的.我當(dāng)時(shí)做的是甘蔗.最后還是得到幾個(gè)轉(zhuǎn)化子的.

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9樓2012-04-09 16:56:17

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neu234

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2樓2012-04-07 20:00:39

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曾經(jīng)遙遠(yuǎn)

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3樓2012-04-08 00:17:16

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wiln1

金蟲(chóng) (小有名氣)

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jhu132llh: 金幣+2, 鼓勵(lì)積極交流 2012-04-09 18:11:30

我覺(jué)得關(guān)鍵還是：共培養(yǎng)后的外植體清洗，多洗幾次，要把農(nóng)桿菌洗得盡可能干凈。我以前第一次做的時(shí)候就是沒(méi)洗干凈不管加多少抗生素都不行，只是時(shí)間問(wèn)題，濃度大了可能農(nóng)桿菌就繁殖得慢點(diǎn)。第二次時(shí)我就多洗了幾次，結(jié)果抗生素濃度低點(diǎn)也不長(zhǎng)菌。

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4樓2012-04-08 07:29:24

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