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ttthx金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問(wèn)如何提高蛋白在酵母菌上清中的表達(dá)呢？
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| 請(qǐng)問(wèn)如何提高蛋白在酵母菌上清中的表達(dá)呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
ttthx: 金幣+10, ★有幫助 2012-04-10 08:24:41
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ttthx: 金幣+10, ★有幫助 2012-04-10 08:24:41
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請(qǐng)問(wèn)如何提高蛋白在酵母菌上清中的表達(dá)呢？ ------------------------------------------------------------ 首先，你這個(gè)問(wèn)題問(wèn)錯(cuò)了。蛋白沒(méi)有辦法在酵母上清中表達(dá)。 你是不是想問(wèn)：如何提高酵母上清中蛋白的含量？ 或是 如何提高酵母內(nèi)某些蛋白的表達(dá)？ 或是 如何提高酵母中蛋白的提取效率？ 如果是第一個(gè)和第三個(gè)問(wèn)題的話 涉及到蛋白質(zhì)的提取。酵母的話我們一般破壁是用酶降解破壁，然后離心去雜質(zhì)，然后降解。這個(gè)過(guò)程中，一方面是在破壁時(shí)，酶解時(shí)間要充分，而且加入酶的量要合適。這個(gè)要根據(jù)實(shí)際情況摸索。沉降蛋白一般沒(méi)有什么難度。 如果是第二個(gè)問(wèn)題。那么，我就要問(wèn)你：你是要異源性表達(dá)蛋白，還是自身表達(dá)的蛋白？ 如果是異源性，那么在載體構(gòu)建時(shí)，選一個(gè)高效啟動(dòng)子載體，誘導(dǎo)表達(dá)即可；如果是第二個(gè)，那么，用營(yíng)養(yǎng)素誘導(dǎo)即可。 這兩個(gè)難度不大。 |
2樓2012-04-08 23:35:37
ttthx
金蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2012-04-09 08:23:44
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