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ttthx金蟲 (小有名氣)
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[求助]
請問如何提高蛋白在酵母菌上清中的表達呢?
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| 請問如何提高蛋白在酵母菌上清中的表達呢? |

金蟲 (小有名氣)

鐵桿木蟲 (著名寫手)
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請問如何提高蛋白在酵母菌上清中的表達呢? ------------------------------------------------------------ 首先,你這個問題問錯了。蛋白沒有辦法在酵母上清中表達。 你是不是想問:如何提高酵母上清中蛋白的含量? 或是 如何提高酵母內(nèi)某些蛋白的表達? 或是 如何提高酵母中蛋白的提取效率? 如果是第一個和第三個問題的話 涉及到蛋白質(zhì)的提取。酵母的話我們一般破壁是用酶降解破壁,然后離心去雜質(zhì),然后降解。這個過程中,一方面是在破壁時,酶解時間要充分,而且加入酶的量要合適。這個要根據(jù)實際情況摸索。沉降蛋白一般沒有什么難度。 如果是第二個問題。那么,我就要問你:你是要異源性表達蛋白,還是自身表達的蛋白? 如果是異源性,那么在載體構建時,選一個高效啟動子載體,誘導表達即可;如果是第二個,那么,用營養(yǎng)素誘導即可。 這兩個難度不大。 |
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