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同一個平板上挑的兩個菌測序,序列差很多,大家?guī)臀铱纯窗,有比對圖!謝謝啦
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4-3-1和4-3-2是一個菌斑搖菌后分裝的兩管樣品測序結(jié)果 4-2-1和4-2-2是同一個平板上另一個菌斑搖菌后分裝的兩管測序結(jié)果 91和92是引物。 四個樣品的峰圖都沒有問題 為什么4-3這組和4-2這組的序列差這么多啊?都是同一批的啊。 第一次碰到這種情況,以前也只是二三個堿基的差異,這次差太多了,什么原因? 我們這個沒有人做,也沒法和別人比對。腫么辦? ![]() |
分子生物學(xué)資料 | 【分子生物】EPI帖 |
金蟲 (小有名氣)
| 有可能是PCR過程特異性不是很好,有非特異條帶,但是在電泳時沒有分開,挖膠回收時一起挖了,后來被一起連接到載體上。還有可能是片段和載體酶切時間過長,內(nèi)切酶產(chǎn)生了星活性,把片段和載體切碎了,這樣連接轉(zhuǎn)化之后測序會出現(xiàn)很多五花八門的結(jié)果。樓主不用糾結(jié),只要有一個是真陽性就行了。一個陽性也沒有建議重新做,不用去找具體原因,因為找原因遠遠比重做要費時間,很多時候?qū)е率〉脑虿恢挂粋。 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
金蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
木蟲 (小有名氣)
| 好吧,其實很簡單啊,假基因說白了就是長得和正常基因沒什么不同,但不行使功能,不行使功能的原因有多種,其中一種可能就是正常基因突變造成的,正;蛲蛔兒螅浔旧砉δ馨l(fā)生大的變化,生物體本身會檢測到,然后就命令此基因不表達了,此基因就變成了假基因儲存在基因組內(nèi),以備后用(現(xiàn)在條件下基因產(chǎn)物不能用不代表以后生物體不用),現(xiàn)在生物體內(nèi)尤其是高等生物體內(nèi),假基因的數(shù)量數(shù)量 |

木蟲 (正式寫手)
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木蟲 (小有名氣)
木蟲 (小有名氣)

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