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幸福常在鐵蟲 (初入文壇)
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做過跨膜蛋白原核表達的戰(zhàn)友過來看看哦 已有1人參與
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| 我的跨膜蛋白,具七次跨膜結(jié)構(gòu),用過PET28a載體分別轉(zhuǎn)過BL21(DE3)和具有稀有密碼子的transset(DE3)宿主,同時做過兩遍的時間誘導(dǎo)(2h,4h,6h)和濃度誘導(dǎo)(0.2,0.6,1.0,1.4的IPTG),同時做是其他基因完美誘導(dǎo)出來了,就是這個具有跨膜結(jié)構(gòu)的一直SDS-PAGE無條帶,現(xiàn)在轉(zhuǎn)換PET32a載體轉(zhuǎn)BL21(de3),但是一直連接不上,目前原核表達已經(jīng)耗時近2個月共8次了,甚為糾結(jié),含淚求各位戰(zhàn)友指教。! |

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