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baby1_9253344金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
重組質(zhì)粒丟失一個(gè)堿基是否影響表達(dá)
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如題，欲將外源基因插入PET30a質(zhì)粒的多酶切位點(diǎn)，表達(dá)蛋白。測(cè)序后發(fā)現(xiàn)在rbs前面的基因處少了個(gè)堿基A，別的地方都正常。不知道這樣是否會(huì)造成錯(cuò)位，影響蛋白表達(dá)？ 如圖，紅圈標(biāo)出位置本應(yīng)是AAA，但測(cè)序結(jié)果是AA....前面測(cè)序的圖挺丑的，不過(guò)后面的峰還是挺分明的（見(jiàn)附件），新手，不懂怎么看測(cè)序圖。求高手解答~~ 測(cè)序圖[ Last edited by baby1_9253344 on 2012-4-10 at 20:13 ] |
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2012-04-10 20:12:36, 257.25 K
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zhaohq1209
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5樓2012-04-11 08:34:37
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2樓2012-04-10 20:43:11
gywyl1977
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baby1_9253344: 金幣+2 2012-04-11 08:23:04
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1）可能就是AAA，因?yàn)榇颂幍纳V峰沒(méi)有分離開(kāi)，機(jī)器可能少讀一個(gè)A。 2）即使少了一個(gè)A, 如果是在rbs前面，不會(huì)造成蛋白的錯(cuò)讀，最多影響點(diǎn)轉(zhuǎn)錄效率； 3）實(shí)在不放心就重新挑個(gè)克隆測(cè)序吧，花不了幾個(gè)錢的。 |
3樓2012-04-10 20:43:37
baby1_9253344
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4樓2012-04-11 08:29:11
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