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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 關于膽堿與乙酰膽堿！
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mas1208ter鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[交流]
關于膽堿與乙酰膽堿！ 已有2人參與
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最近需要做膽堿與乙酰膽堿的傳感器，但是不了解這兩種物質的催化酶也就是膽堿氧化酶與乙酰膽堿酯酶的結構與信息，急切想知道這兩種酶的圓二色譜信息，其中α螺旋與β折疊的比例問題，酶的尺寸大小，形狀‘，活性區(qū)域等，希望好心人給予幫助！ 感謝幫忙！ |
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AChE 晶體結構： 1991 年, Sussman 等首次報道了電鰩(Torpedocalifornica, Tc) 的AChE 催化亞基晶體X射線衍射圖譜。該催化亞基是由14 個A螺旋與12 個B折疊組成的大小為415 nm ×610 nm×615 nm 的橢球形分子, A螺旋、B折疊在晶體中的含量分別為15%、30% , B折疊位于橢球形分子的中央, A螺旋將其包圍。AChE 的晶體形式是有糖酯錨的同源二聚體, 同源二聚體被42螺旋束抱緊, 42螺旋束由來自每個亞單位的螺旋AF’3 和AH 組成。唯一的鏈間二硫鍵與羧基端的Cys537 有關。氨基端和羧基端的1～ 3 氨基酸殘基和暴露的嚕噗(loop ) (485～ 489) 在電子密度圖中看不到, 可能是因為末端的3 個氨基酸殘基和膜錨定結構域的寡聚糖延伸是無序的。4 個糖基化位點之一A sn416 附近的電子密度與糖成分相對應。 乙酰膽堿酯酶的三維結構： 應用原子力顯微技術對AChE 進行成像,發(fā)現AChE呈均勻的橢圓形顆粒,與X-衍射的形態(tài)相似,大小為98 ×79 ×3nm。AChE 活性中心由三個主要區(qū)域組成: ①酯解部位:含絲氨酸、組氨酸,能與ACh 的羰基碳原子結合; ②陰離子部位:至少含一個羰基,可能來自谷氨酸,能以靜電吸引ACh 的季銨陽離子基團; ③疏水性區(qū)域:與酯解或季銨基團結合部位連結或在其附近,由色氨酸或酪氨酸等芳香族氨基酸組成,在與芳香基底物結合中起重要作用。 立體結構分析顯示,其最突出的特征是有一深而窄的峽谷,AChE 的催化活性集團即位于此峽谷中。而在酶活性中心部位,過去認為靜電吸收底物中帶正電荷(氮) 部分的帶6～9 個負電荷的陰離子部位可能并不存在,因其僅有一個帶負電荷的Glu1299 氨基酸殘基。ACh 的季銨陽離子基團可能通過與AChE 峽谷四周鑲嵌著的芳香氨基酸殘基的結合而發(fā)生相互作用。通過定點突變技術,顯示酶的活性中心催化三聯體單元為絲氨酸、組氨酸和谷氨酸,而通過計算機模擬研究TcAChE 與ACh 相互作用,認為催化三聯體可能由絲氨酸、苯丙氨酸、組氨酸和色氨酸組成,谷氨酸則在促進質子轉移過程中起重要作用。生理條件下,定位于突觸后膜上的AChE 的生理功能主要是催化水解ACh ,這是通過AChE 活性中心酯解部位的催化作用實現的。人腦AChE 活性中心由絲氨酸、組氨酸、谷氨酸、丙氨酸、色氨酸和兩個甘氨酸共7 個殘基組成,直接作用于ACh 的催化三元體可能是絲氨酸、組氨酸和色氨酸3 個殘基組成的。 |
2樓2007-03-31 10:05:57
白熬樂之
木蟲 (正式寫手)
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3樓2007-04-01 11:13:15
mas1208ter
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4樓2007-04-02 10:51:52
5樓2011-03-25 11:20:51
| 好 |
6樓2015-07-31 00:40:21
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