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mas1208ter鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[交流]
關(guān)于膽堿與乙酰膽堿！ 已有2人參與
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最近需要做膽堿與乙酰膽堿的傳感器，但是不了解這兩種物質(zhì)的催化酶也就是膽堿氧化酶與乙酰膽堿酯酶的結(jié)構(gòu)與信息，急切想知道這兩種酶的圓二色譜信息，其中α螺旋與β折疊的比例問題，酶的尺寸大小，形狀‘，活性區(qū)域等，希望好心人給予幫助！ 感謝幫忙！ |
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insect2004
銀蟲 (小有名氣)
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AChE 晶體結(jié)構(gòu)： 1991 年, Sussman 等首次報(bào)道了電鰩(Torpedocalifornica, Tc) 的AChE 催化亞基晶體X射線衍射圖譜。該催化亞基是由14 個(gè)A螺旋與12 個(gè)B折疊組成的大小為415 nm ×610 nm×615 nm 的橢球形分子, A螺旋、B折疊在晶體中的含量分別為15%、30% , B折疊位于橢球形分子的中央, A螺旋將其包圍。AChE 的晶體形式是有糖酯錨的同源二聚體, 同源二聚體被42螺旋束抱緊, 42螺旋束由來自每個(gè)亞單位的螺旋AF’3 和AH 組成。唯一的鏈間二硫鍵與羧基端的Cys537 有關(guān)。氨基端和羧基端的1～ 3 氨基酸殘基和暴露的嚕噗(loop ) (485～ 489) 在電子密度圖中看不到, 可能是因?yàn)槟┒说? 個(gè)氨基酸殘基和膜錨定結(jié)構(gòu)域的寡聚糖延伸是無序的。4 個(gè)糖基化位點(diǎn)之一A sn416 附近的電子密度與糖成分相對(duì)應(yīng)。 乙酰膽堿酯酶的三維結(jié)構(gòu)： 應(yīng)用原子力顯微技術(shù)對(duì)AChE 進(jìn)行成像,發(fā)現(xiàn)AChE呈均勻的橢圓形顆粒,與X-衍射的形態(tài)相似,大小為98 ×79 ×3nm。AChE 活性中心由三個(gè)主要區(qū)域組成: ①酯解部位:含絲氨酸、組氨酸,能與ACh 的羰基碳原子結(jié)合; ②陰離子部位:至少含一個(gè)羰基,可能來自谷氨酸,能以靜電吸引ACh 的季銨陽(yáng)離子基團(tuán); ③疏水性區(qū)域:與酯解或季銨基團(tuán)結(jié)合部位連結(jié)或在其附近,由色氨酸或酪氨酸等芳香族氨基酸組成,在與芳香基底物結(jié)合中起重要作用。 立體結(jié)構(gòu)分析顯示,其最突出的特征是有一深而窄的峽谷,AChE 的催化活性集團(tuán)即位于此峽谷中。而在酶活性中心部位,過去認(rèn)為靜電吸收底物中帶正電荷(氮) 部分的帶6～9 個(gè)負(fù)電荷的陰離子部位可能并不存在,因其僅有一個(gè)帶負(fù)電荷的Glu1299 氨基酸殘基。ACh 的季銨陽(yáng)離子基團(tuán)可能通過與AChE 峽谷四周鑲嵌著的芳香氨基酸殘基的結(jié)合而發(fā)生相互作用。通過定點(diǎn)突變技術(shù),顯示酶的活性中心催化三聯(lián)體單元為絲氨酸、組氨酸和谷氨酸,而通過計(jì)算機(jī)模擬研究TcAChE 與ACh 相互作用,認(rèn)為催化三聯(lián)體可能由絲氨酸、苯丙氨酸、組氨酸和色氨酸組成,谷氨酸則在促進(jìn)質(zhì)子轉(zhuǎn)移過程中起重要作用。生理?xiàng)l件下,定位于突觸后膜上的AChE 的生理功能主要是催化水解ACh ,這是通過AChE 活性中心酯解部位的催化作用實(shí)現(xiàn)的。人腦AChE 活性中心由絲氨酸、組氨酸、谷氨酸、丙氨酸、色氨酸和兩個(gè)甘氨酸共7 個(gè)殘基組成,直接作用于ACh 的催化三元體可能是絲氨酸、組氨酸和色氨酸3 個(gè)殘基組成的。 |
2樓2007-03-31 10:05:57
白熬樂之
木蟲 (正式寫手)
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3樓2007-04-01 11:13:15
mas1208ter
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4樓2007-04-02 10:51:52
5樓2011-03-25 11:20:51
| 好 |
6樓2015-07-31 00:40:21
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