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mas1208ter鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[交流]
關于膽堿與乙酰膽堿! 已有2人參與
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最近需要做膽堿與乙酰膽堿的傳感器,但是不了解這兩種物質(zhì)的催化酶也就是膽堿氧化酶與乙酰膽堿酯酶的結構與信息,急切想知道這兩種酶的圓二色譜信息,其中α螺旋與β折疊的比例問題,酶的尺寸大小,形狀‘,活性區(qū)域等,希望好心人給予幫助! 感謝幫忙! |

木蟲 (正式寫手)
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AChE 晶體結構: 1991 年, Sussman 等首次報道了電鰩(Torpedocalifornica, Tc) 的AChE 催化亞基晶體X射線衍射圖譜。該催化亞基是由14 個A螺旋與12 個B折疊組成的大小為415 nm ×610 nm×615 nm 的橢球形分子, A螺旋、B折疊在晶體中的含量分別為15%、30% , B折疊位于橢球形分子的中央, A螺旋將其包圍。AChE 的晶體形式是有糖酯錨的同源二聚體, 同源二聚體被42螺旋束抱緊, 42螺旋束由來自每個亞單位的螺旋AF’3 和AH 組成。唯一的鏈間二硫鍵與羧基端的Cys537 有關。氨基端和羧基端的1~ 3 氨基酸殘基和暴露的嚕噗(loop ) (485~ 489) 在電子密度圖中看不到, 可能是因為末端的3 個氨基酸殘基和膜錨定結構域的寡聚糖延伸是無序的。4 個糖基化位點之一A sn416 附近的電子密度與糖成分相對應。 乙酰膽堿酯酶的三維結構: 應用原子力顯微技術對AChE 進行成像,發(fā)現(xiàn)AChE呈均勻的橢圓形顆粒,與X-衍射的形態(tài)相似,大小為98 ×79 ×3nm。AChE 活性中心由三個主要區(qū)域組成: ①酯解部位:含絲氨酸、組氨酸,能與ACh 的羰基碳原子結合; ②陰離子部位:至少含一個羰基,可能來自谷氨酸,能以靜電吸引ACh 的季銨陽離子基團; ③疏水性區(qū)域:與酯解或季銨基團結合部位連結或在其附近,由色氨酸或酪氨酸等芳香族氨基酸組成,在與芳香基底物結合中起重要作用。 立體結構分析顯示,其最突出的特征是有一深而窄的峽谷,AChE 的催化活性集團即位于此峽谷中。而在酶活性中心部位,過去認為靜電吸收底物中帶正電荷(氮) 部分的帶6~9 個負電荷的陰離子部位可能并不存在,因其僅有一個帶負電荷的Glu1299 氨基酸殘基。ACh 的季銨陽離子基團可能通過與AChE 峽谷四周鑲嵌著的芳香氨基酸殘基的結合而發(fā)生相互作用。通過定點突變技術,顯示酶的活性中心催化三聯(lián)體單元為絲氨酸、組氨酸和谷氨酸,而通過計算機模擬研究TcAChE 與ACh 相互作用,認為催化三聯(lián)體可能由絲氨酸、苯丙氨酸、組氨酸和色氨酸組成,谷氨酸則在促進質(zhì)子轉(zhuǎn)移過程中起重要作用。生理條件下,定位于突觸后膜上的AChE 的生理功能主要是催化水解ACh ,這是通過AChE 活性中心酯解部位的催化作用實現(xiàn)的。人腦AChE 活性中心由絲氨酸、組氨酸、谷氨酸、丙氨酸、色氨酸和兩個甘氨酸共7 個殘基組成,直接作用于ACh 的催化三元體可能是絲氨酸、組氨酸和色氨酸3 個殘基組成的。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)

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