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yinxiang_1銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
DEAE純化重組蛋白無法完全洗脫下來。
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我的重組蛋白吧，先過的Ni-NTA粗純化，然后復(fù)性。上的DEAE離子交換柱，每次上樣穿出液A280都有一個很高的吸收峰，SDS-PAGE檢測不到。后來發(fā)現(xiàn)有一部分目的蛋白在柱子上下不來，導(dǎo)致DEAE后純度反而變低。 嘗試用過1M NaoH，NaAc，2MNacl都無法把蛋白洗脫下（我們挖了一部分膠跑的SDS-PAGE） 請問這是為什么，有什么方法可以把蛋白洗脫下來么，我蛋白等電點是4.7.上樣buffer pH7.4,6.5都試過。 |
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