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noise_1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

[求助] 福林酚法測(cè)總酚含量 已有3人參與

現(xiàn)在用福林酚法測(cè)試總酚含量。
參考的茶多酚的總酚含量測(cè)定,有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的。
配置沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(10ug/ ml-50ug/ml),加5ml 稀釋10倍的福林酚試劑,4ml濃度為7.5%的碳酸鈉,1h后測(cè)定。
我做全波長(zhǎng)掃描的時(shí)候,400到800部分吸收度相當(dāng)?shù)牡,甚至是?fù)數(shù),但是有變化趨勢(shì),就算掃到1000nm吸收的峰型也是很平滑的,也比較低。
按照道理國(guó)標(biāo)中的這個(gè)濃度測(cè)定的話 不該這么低的吸收度。
現(xiàn)在唯一懷疑的問(wèn)題是不是蒸餾水的問(wèn)題。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室沒(méi)有蒸餾水設(shè)備,一般液相用水都是買(mǎi)的娃哈哈,實(shí)驗(yàn)中的一般用水就拿過(guò)濾過(guò)的自來(lái)水,我是用后者來(lái)替代蒸餾水的,是不是里面的有些離子影響實(shí)驗(yàn)?
是不是我該用娃哈哈來(lái)試一下?
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藍(lán)色de風(fēng)雪

至尊木蟲(chóng) (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖


hsd3521: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-05-20 08:08:59
記得剛開(kāi)始時(shí)我也是按gb加福林酚 結(jié)果吸光值太小
于是在增大福林酚量后就好多了
建議做工作曲線時(shí)按實(shí)際濃度算而不是按gb上說(shuō)的濃度,會(huì)好點(diǎn)
4樓2012-05-18 22:20:01
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masterboyama

鐵蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

【答案】應(yīng)助回帖


hsd3521: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-10-24 19:48:43
樓主,問(wèn)題出在碳酸鈉上,你提供的堿性環(huán)境不夠,你把碳酸鈉替換成加入1.5毫升飽和的碳酸鈉試試

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]
13樓2012-10-23 06:50:11
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quliuzhu

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
我覺(jué)得是你的福林酚的問(wèn)題,你的福林酚試劑是自己配置的還是買(mǎi)的現(xiàn)成的,如果是現(xiàn)成的應(yīng)該是直接使用的,不用稀釋。
海納百川有容乃大,壁立千仞無(wú)欲則剛
2樓2012-04-17 18:35:05
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藍(lán)色de風(fēng)雪

至尊木蟲(chóng) (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:
5樓: Originally posted by noise_1987 at 2012-06-06 20:23:57
吸光度的數(shù)值較低的話 待測(cè)液的濃度也是影響因素,我現(xiàn)在50ug/ml的沒(méi)食子酸溶液 一毫升,加入10ml容量瓶反映體系,吸光度也能達(dá)到0.5以上,就是十分不穩(wěn)定,1h的時(shí)候取出來(lái)測(cè)定后把比色皿里的溶液倒回容量瓶,搖勻 ...

碳酸鈉濃度和加入量,注意下這個(gè)
50ml容量瓶顯色,在沒(méi)食子酸達(dá)到10ppm以下選國(guó)藥的福林酚1.5ml就可以了,我的結(jié)果是這樣
大體是1ppm沒(méi)食子酸對(duì)應(yīng)0.1ml福林酚
6樓2012-06-07 13:15:30
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藍(lán)色de風(fēng)雪

至尊木蟲(chóng) (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖


hsd3521: 金幣+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 感謝交流,歡迎常來(lái)食品版,謝謝 2012-06-09 19:47:26
引用回帖:
7樓: Originally posted by noise_1987 at 2012-06-07 22:54:42
國(guó)藥的福林酚?我找了好久 都沒(méi)找到 能不能給個(gè)購(gòu)買(mǎi)途徑
附近幾個(gè)提供試劑的公司都是賣(mài)進(jìn)口分裝 要不就是國(guó)產(chǎn)的一些牌子。...

我也是通過(guò)試劑公司購(gòu)買(mǎi)的
http://www.reagent.com.cn/productsinfo.asp?id=73104861
這是他們的網(wǎng)址
試劑公司一瓶加了80,沒(méi)辦法啊
8樓2012-06-08 00:46:00
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liangxingqiu

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

你好!我現(xiàn)在也在測(cè)總酚,但做三個(gè)平行試驗(yàn),三、三個(gè)平行實(shí)驗(yàn)的吸光度值都差別很大,你們有沒(méi)有出現(xiàn)這種情況呢?郁悶啊,做了N次都是這樣的結(jié)果,求指教啊!
11樓2012-10-22 13:33:02
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小毛孩24

專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)

【答案】應(yīng)助回帖

hsd3521: 應(yīng)助指數(shù)+1 2012-10-24 19:48:12
我做的是0.5ml樣品(標(biāo)準(zhǔn)曲線)+ 1ml 10% FC試劑 +2 ml 20%的碳酸鈉,妥妥的
12樓2012-10-22 21:22:57
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masterboyama

鐵蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

【答案】應(yīng)助回帖

hsd3521: 應(yīng)助指數(shù)+1 2012-10-24 19:48:33
樓上那位說(shuō)重復(fù)性不好的同學(xué),你可能是沒(méi)有渦旋混勻

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]
14樓2012-10-23 06:53:43
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藍(lán)色de風(fēng)雪

至尊木蟲(chóng) (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:
17樓: Originally posted by 晴夢(mèng)愜cool at 2013-06-04 10:21:04
你好,網(wǎng)上好多福林酚試劑介紹的時(shí)候都說(shuō)是適用于測(cè)蛋白,這個(gè)可以測(cè)總酚嗎?...

當(dāng)時(shí)我就是參照GB8313測(cè)的酚 只是不想自己配福林酚所以買(mǎi)的成品
18樓2013-06-04 12:29:40
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浪仙7639

銀蟲(chóng) (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

我感覺(jué)是你的福林酚有問(wèn)題,這個(gè)一定要稀釋的,不稀的話吸光度太高是做不出來(lái)的,福林酚是生化試劑要低溫存放,常溫很容易變質(zhì)的。國(guó)標(biāo)是沒(méi)有問(wèn)題的,有的試劑供應(yīng)商做的也是不好,沒(méi)準(zhǔn)你買(mǎi)來(lái)就變質(zhì)了。
21樓2014-05-12 19:40:39
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普通回帖

noise_1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

引用回帖:
2樓: Originally posted by quliuzhu at 2012-04-17 18:35:05:
我覺(jué)得是你的福林酚的問(wèn)題,你的福林酚試劑是自己配置的還是買(mǎi)的現(xiàn)成的,如果是現(xiàn)成的應(yīng)該是直接使用的,不用稀釋。

福林酚是買(mǎi)的現(xiàn)成的,酸度為1N,國(guó)標(biāo)中茶多酚用的就是這個(gè)(購(gòu)買(mǎi)的時(shí)候客服說(shuō)咨詢過(guò)茶葉標(biāo)準(zhǔn)制定的研究所,當(dāng)時(shí)制定標(biāo)準(zhǔn)用的就是這個(gè)酸度的),是稀釋10倍做的,一些國(guó)外文獻(xiàn)也是要稀釋的。
3樓2012-04-17 20:23:11
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noise_1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

引用回帖:
4樓: Originally posted by 藍(lán)色de風(fēng)雪 at 2012-05-18 22:20:01
記得剛開(kāi)始時(shí)我也是按gb加福林酚 結(jié)果吸光值太小
于是在增大福林酚量后就好多了
建議做工作曲線時(shí)按實(shí)際濃度算而不是按gb上說(shuō)的濃度,會(huì)好點(diǎn)

吸光度的數(shù)值較低的話 待測(cè)液的濃度也是影響因素,我現(xiàn)在50ug/ml的沒(méi)食子酸溶液 一毫升,加入10ml容量瓶反映體系,吸光度也能達(dá)到0.5以上,就是十分不穩(wěn)定,1h的時(shí)候取出來(lái)測(cè)定后把比色皿里的溶液倒回容量瓶,搖勻后立馬倒進(jìn)比色皿再測(cè),吸光度都有0.03甚至更高的差別,我的的確確是搖勻了。就是不知道怎么回事。

福林酚的用量需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)得出,應(yīng)該有個(gè)最適的量。
5樓2012-06-06 20:23:57
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noise_1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

引用回帖:
6樓: Originally posted by 藍(lán)色de風(fēng)雪 at 2012-06-07 13:15:30
碳酸鈉濃度和加入量,注意下這個(gè)
50ml容量瓶顯色,在沒(méi)食子酸達(dá)到10ppm以下選國(guó)藥的福林酚1.5ml就可以了,我的結(jié)果是這樣
大體是1ppm沒(méi)食子酸對(duì)應(yīng)0.1ml福林酚...

國(guó)藥的福林酚?我找了好久 都沒(méi)找到 能不能給個(gè)購(gòu)買(mǎi)途徑
附近幾個(gè)提供試劑的公司都是賣(mài)進(jìn)口分裝 要不就是國(guó)產(chǎn)的一些牌子。
7樓2012-06-07 22:54:42
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noise_1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

引用回帖:
8樓: Originally posted by 藍(lán)色de風(fēng)雪 at 2012-06-08 00:46:00
我也是通過(guò)試劑公司購(gòu)買(mǎi)的
http://www.reagent.com.cn/productsinfo.asp?id=73104861
這是他們的網(wǎng)址
試劑公司一瓶加了80,沒(méi)辦法啊...

謝謝。我看一下 我自己買(mǎi)的125m給我都?jí)K折騰完了。
9樓2012-06-08 23:01:05
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yilisha_1988

新蟲(chóng) (初入文壇)

麻煩問(wèn)一下,測(cè)多酚的時(shí)候,還原糖對(duì)結(jié)果的影響大不大?
一粒沙的思念
10樓2012-10-16 21:00:56
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