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多重PCR引物的設(shè)計思路流程（融合基因）��！新手入門中。。各種問題。。
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融合基因的四重PCR引物的設(shè)計，有什么常用的思路嗎？如何入手？ 用oligo來設(shè)計。是先需要把四個融合基因來多序列比對找出相似度低的區(qū)域嗎？ 我用vector NTI多序列比對，但是不知道如何從比對結(jié)果中找出相似度低的區(qū)段。 之后想加入探針，所以在設(shè)計引物時應(yīng)該為探針留下多長的序列呢？探針應(yīng)該放在融合點之前嗎？那么在融合點之后需要留多少bp呢（想要檢測融合點的基因，主要想擴增融合點的基因）？ 總是有很多的二聚體，如何從對引物的條件設(shè)置上來減輕工作量呢？ 問題太多了。。如果有經(jīng)驗的前輩，麻煩指點一二~選擇性回答也行~急~ 謝謝~~ |
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