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alqfren木蟲 (正式寫手)
研究僧
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[交流]
不同類別的蛋白酶的活力測定 已有8人參與
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根據(jù)GB23527-2009蛋白酶制劑方法，測定方法中蛋白酶緩沖液分為三種磷酸、乳酸、硼酸，pH分別為7.5、10.5、3.0，分別用于稀釋中性、堿性、酸性蛋白酶。 問題是，如果這幾個pH都不是酶活的最適pH，同一溫度條件40℃下不同酶之間測出來的活力有可比性嗎？ 比如兩種蛋白酶的活力都是20萬，那如果取相同單位的酶同一條件下水解蛋白，結(jié)果會一樣嗎？ 我覺得國標測定酶活的方法，只適合同一種酶的測定，不一樣的酶是沒有可比性的。 所以，諾維信等廠家才會用自己測定酶活的方法和不同酶活單位來標注不同的酶，對不對？ 那我現(xiàn)在比較幾種蛋白酶的酶解效果，按照統(tǒng)一的酶活力單位來添加的話，是不是根本沒有意義？ |
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zxc6884
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4樓2012-04-25 19:50:41
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2樓2012-04-25 10:54:31
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| 其實，酶活檢測僅僅是對酶活大小的初步判定，主要還是要看其對應(yīng)用底物（不一定是酪蛋白）的酶解效果，通過酶解產(chǎn)物的監(jiān)測比酶活檢測更準確，當然還要摸索適合的酶解條件了；如果兩種蛋白酶的活力都是20萬，那如果取相同單位的酶同一條件下水解蛋白，結(jié)果可能不一樣，每種酶都有它的最適底物和條件；那我現(xiàn)在比較幾種蛋白酶的酶解效果，按照統(tǒng)一的酶活力單位來添加的話，不一定沒有意義，它只是作為一個初篩的標準，而且要根據(jù)你用的幾種蛋白酶的最適條件（酸、中、堿性）去酶解，去監(jiān)測產(chǎn)物，再去考慮酶加量、底物量、酶解時間、溫度和pH。 |
5樓2012-04-26 13:12:01
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