| 查看: 3005 | 回復(fù): 12 | |||
alqfren木蟲 (正式寫手)
研究僧
|
[交流]
不同類別的蛋白酶的活力測(cè)定 已有8人參與
|
|
根據(jù)GB23527-2009蛋白酶制劑方法,測(cè)定方法中蛋白酶緩沖液分為三種磷酸、乳酸、硼酸,pH分別為7.5、10.5、3.0,分別用于稀釋中性、堿性、酸性蛋白酶。 問題是,如果這幾個(gè)pH都不是酶活的最適pH,同一溫度條件40℃下不同酶之間測(cè)出來(lái)的活力有可比性嗎? 比如兩種蛋白酶的活力都是20萬(wàn),那如果取相同單位的酶同一條件下水解蛋白,結(jié)果會(huì)一樣嗎? 我覺得國(guó)標(biāo)測(cè)定酶活的方法,只適合同一種酶的測(cè)定,不一樣的酶是沒有可比性的。 所以,諾維信等廠家才會(huì)用自己測(cè)定酶活的方法和不同酶活單位來(lái)標(biāo)注不同的酶,對(duì)不對(duì)? 那我現(xiàn)在比較幾種蛋白酶的酶解效果,按照統(tǒng)一的酶活力單位來(lái)添加的話,是不是根本沒有意義? |

木蟲 (著名寫手)
木蟲 (正式寫手)
研究僧

鐵桿木蟲 (著名寫手)

木蟲 (著名寫手)
| 其實(shí),酶活檢測(cè)僅僅是對(duì)酶活大小的初步判定,主要還是要看其對(duì)應(yīng)用底物(不一定是酪蛋白)的酶解效果,通過(guò)酶解產(chǎn)物的監(jiān)測(cè)比酶活檢測(cè)更準(zhǔn)確,當(dāng)然還要摸索適合的酶解條件了;如果兩種蛋白酶的活力都是20萬(wàn),那如果取相同單位的酶同一條件下水解蛋白,結(jié)果可能不一樣,每種酶都有它的最適底物和條件;那我現(xiàn)在比較幾種蛋白酶的酶解效果,按照統(tǒng)一的酶活力單位來(lái)添加的話,不一定沒有意義,它只是作為一個(gè)初篩的標(biāo)準(zhǔn),而且要根據(jù)你用的幾種蛋白酶的最適條件(酸、中、堿性)去酶解,去監(jiān)測(cè)產(chǎn)物,再去考慮酶加量、底物量、酶解時(shí)間、溫度和pH。 |
木蟲 (正式寫手)
研究僧
沒有看懂什么意思,邏輯有點(diǎn)小亂,能否再解釋一下?我現(xiàn)在就是要比較三種酶的酶解效果,活力沒有測(cè)定。酶標(biāo)注的酶活單位也不一樣。 酶活需不需要測(cè)?酶活力用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)來(lái)測(cè)?測(cè)出來(lái)的結(jié)果也不能真實(shí)的反應(yīng)對(duì)同一種底物最大水解能力,有什么意義? 你說(shuō)該怎么設(shè)計(jì)試驗(yàn)就能夠準(zhǔn)確的反應(yīng)我要的結(jié)果? |

木蟲 (著名寫手)
|
不清楚樓主用三種酶去酶解什么底物或是僅僅檢測(cè)酶活, 酶活需要用國(guó)標(biāo)測(cè),比如你去酶解血紅蛋白,每克血紅蛋白水解需要m單位的酶活,根據(jù)你測(cè)得酶活去換算用酶量,在每種酶的最適條件(溫度、pH等,可以向廠家要的)下去酶解,去監(jiān)測(cè)小肽含量,根據(jù)小肽含量的高低初步判定哪種酶的酶解效果好,再去優(yōu)化那種酶的條件,如果你不嫌麻煩的話,每種酶都可以多設(shè)置幾個(gè)梯度,去優(yōu)化,看酶解效果 |
木蟲 (正式寫手)
新手上路

| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 359求調(diào)劑 +5 | 王了個(gè)楠 2026-03-25 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
|
gr哈哈哈 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿南開大學(xué)0710生物學(xué)359求調(diào)劑 +5 | 兔兔兔111223314 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +3 | 末未mm 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +5 | Faune 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程調(diào)劑 +8 | 深V宿舍吧 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
[考研] 070300化學(xué)354求調(diào)劑 +7 | 101次希望 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
[考研] 283求調(diào)劑(080500) +14 | A child 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
[考研] 化學(xué)工程085602 305分求調(diào)劑 +25 | RichLi_ 2026-03-25 | 25/1250 |
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Lyy930824@ 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
[考研] 375求調(diào)劑 +6 | 雨夏整夜 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
[考研] 【求調(diào)劑】085601材料工程專碩 | 總分272 | +7 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
[考研] 08工科求調(diào)劑286 +3 | tgs_001 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +8 | Li李魚 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
[考研] 320分,材料與化工專業(yè),求調(diào)劑 +9 | 一定上岸aaa 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑,各位老師看看我。。 +5 | 祁祺祺 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
[考研] 290分調(diào)劑求助 +3 | 吉祥止止陳 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料專碩 335 分求調(diào)劑 +4 | 拒絕冷暴力 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料與化工303分求調(diào)劑 +4 | 為學(xué)666 2026-03-24 | 4/200 |
|