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alqfren木蟲 (正式寫手)
研究僧
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[交流]
不同類別的蛋白酶的活力測定 已有8人參與
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根據(jù)GB23527-2009蛋白酶制劑方法，測定方法中蛋白酶緩沖液分為三種磷酸、乳酸、硼酸，pH分別為7.5、10.5、3.0，分別用于稀釋中性、堿性、酸性蛋白酶。 問題是，如果這幾個pH都不是酶活的最適pH，同一溫度條件40℃下不同酶之間測出來的活力有可比性嗎？ 比如兩種蛋白酶的活力都是20萬，那如果取相同單位的酶同一條件下水解蛋白，結(jié)果會一樣嗎？ 我覺得國標(biāo)測定酶活的方法，只適合同一種酶的測定，不一樣的酶是沒有可比性的。 所以，諾維信等廠家才會用自己測定酶活的方法和不同酶活單位來標(biāo)注不同的酶，對不對？ 那我現(xiàn)在比較幾種蛋白酶的酶解效果，按照統(tǒng)一的酶活力單位來添加的話，是不是根本沒有意義？ |
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zhangyt7638
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
zhaohq1209: 金幣+2, 鼓勵交流~ 2012-04-27 13:11:16
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
zhaohq1209: 金幣+2, 鼓勵交流~ 2012-04-27 13:11:16
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不清楚樓主用三種酶去酶解什么底物或是僅僅檢測酶活， 酶活需要用國標(biāo)測，比如你去酶解血紅蛋白，每克血紅蛋白水解需要m單位的酶活，根據(jù)你測得酶活去換算用酶量，在每種酶的最適條件（溫度、pH等，可以向廠家要的）下去酶解，去監(jiān)測小肽含量，根據(jù)小肽含量的高低初步判定哪種酶的酶解效果好，再去優(yōu)化那種酶的條件，如果你不嫌麻煩的話，每種酶都可以多設(shè)置幾個梯度，去優(yōu)化，看酶解效果 |
7樓2012-04-27 11:06:37
biolio2009
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4樓2012-04-25 19:50:41
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