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hxjhxj新蟲 (初入文壇)
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[求助]
多糖酶解 HPLC 去酶 已有2人參與
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急求！��！ 我對提取的多糖進(jìn)行了酶解，之后要用HPLC對水解后得到的寡糖進(jìn)行分析。但是擔(dān)心加入的酶試劑會影響HPLC的分析。一方面擔(dān)心酶會不會堵柱子，還有一方面擔(dān)心酶的峰會不會影響寡糖峰。 0.22的膜能過掉纖維素酶么？如果不能我該怎么出去這部分酶呢？它的存在會不會影響我的多糖酶解結(jié)果分析。 我考慮過sevage去蛋白，但是那樣之后要進(jìn)行透析，我擔(dān)心透析的過程會把水解得到的寡糖去掉了。 有沒有哪位前輩做過多糖酶解后HPLC分析的，可以給一些意見么？ |
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liuwei10987
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11樓2014-08-02 15:00:56
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hxjhxj(zybpxy代發(fā)): 金幣+5 2014-08-17 10:23:28
hxjhxj(zybpxy代發(fā)): 金幣+5 2014-08-17 10:23:28
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你可以考慮按照以下方法解決： 1）如果你是酶解樣品，pH在中性范圍，可以用95攝氏度加熱5min滅活，15000g離心15min或0.22微米水洗濾膜過濾進(jìn)樣； 2）如果你是酶解樣品，pH在酸性（小于3）或堿性（大于10）范圍，則不能加熱，需要調(diào)節(jié)至中性再按照1）中處理； 如果單純使用0.22微米濾膜無法將沒進(jìn)行有效過濾，氣質(zhì)可以過濾菌體或與之相似大小物質(zhì)。 |
12樓2014-08-08 01:02:50
hxjhxj
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