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[交流]
食物的排鉛實驗如何作?
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如題：想分析一種食物是否具有排鉛功能，該如何設(shè)計實驗？除動物實驗外，可有公認(rèn)的方法？多謝交流！ [ Last edited by lovibond on 2012-5-10 at 15:45 ] |
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7樓2012-05-04 10:00:50
★ ★ ★ ★
unfemale(金幣+1): 謝謝參與
unfemale: 金幣+2, 多謝！ 2012-05-04 08:09:27
hsd3521: 金幣+1, 歡迎關(guān)注食品版 2012-05-04 20:07:26
unfemale(金幣+1): 謝謝參與
unfemale: 金幣+2, 多謝！ 2012-05-04 08:09:27
hsd3521: 金幣+1, 歡迎關(guān)注食品版 2012-05-04 20:07:26
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試驗項目 動物實驗： 1體重 2血鉛 3 骨鉛 4肝組織鉛 人體試食試驗： 1血鉛 2尿鉛 3 尿鈣 4尿鋅 試驗原則： 動物實驗和人體試食試驗所列指標(biāo)均為必做項目。 根據(jù)受試樣品作用原理的不同，預(yù)防性高鉛動物模型和治療性高鉛動物模型選其一進行實驗。 應(yīng)對臨床癥狀、體征進行觀察。 對尿鉛進行多次測定，以了解體內(nèi)鉛的排出情況。 在進行人體試食試驗時，應(yīng)對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察。 結(jié)果判定 動物實驗：骨鉛和肝組織鉛任一指標(biāo)明顯降低，可判定該受試樣品促進排鉛功能動物實驗結(jié)果陽性。 人體試食試驗：任一觀察時點尿鉛排出量或總尿鉛排出量明顯增加并對總尿鈣、總尿鋅的排出無明顯影響，或總尿鈣、總尿鋅排出增加的幅度小于總尿鉛排出增加的幅度，可判定 該受試樣品具有促進排鉛功能的作用。 |
6樓2012-05-04 00:21:58
8樓2012-05-05 18:52:20
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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藥監(jiān)局2012年4月發(fā)布了國食藥監(jiān)�；痆2012]107號文件“關(guān)于印發(fā)抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知”，以后評價方法就采用這個了。請參考。 促進排鉛功能評價方法 試驗項目、試驗原則及結(jié)果判定 Items, Principles and Result Assessment 1 試驗項目 1.1 動物實驗 1.1.1 體重 1.1.2 血鉛 1.1.3 骨鉛 1.1.4 肝組織鉛 1.2 人體試食試驗 1.2.1 血鉛 1.2.2 尿鉛 1.2.3 尿鈣 1.2.4 尿鋅 2 試驗原則 2.1 動物實驗和人體試食試驗所列指標(biāo)均為必做項目。 2.2 應(yīng)對臨床癥狀、體征進行觀察。 2.3 應(yīng)對尿鉛進行多次測定，以了解體內(nèi)鉛的排出情況。 2.4 在進行人體試食試驗時，應(yīng)對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察。 3 結(jié)果判定 3.1 動物實驗：實驗組與模型對照組比較，骨鉛含量顯著降低，同時血鉛或肝鉛顯著降低，可判定該受試樣品動物實驗結(jié)果為陽性。 3.2 人體試食試驗：試食組與對照組組間比較，至少兩個觀察時點尿鉛排出量增加且顯著高于試驗前，或總尿鉛排出量明顯增加。同時，對總尿鈣、總尿鋅的排出無明顯影響，或總尿鈣、總尿鋅排出增加的幅度小于總尿鉛排出增加的幅度，可判定該受試樣品具有促進排鉛功能。 促進排鉛功能檢驗方法 Method for the Assessment of Alleviating Lead Excretion Function 1 動物實驗 1.1 實驗原理 實驗動物經(jīng)口給予含鉛化合物（推薦使用醋酸鉛），可造成組織中鉛含量增高。造模早期以肝、腎等組織中增高明顯，之后骨組織中鉛含量逐漸增高。比較給予實驗動物受試樣品后，模型動物組織中鉛含量的變化情況，以確定此受試樣品是否具有促進機體排鉛的作用。 1.2 實驗動物 推薦使用成年大鼠，單一性別，體重150－200克，每組8－12只。小鼠則應(yīng)使用近交系動物，單一性別，體重18－22克，每組10－15只。 1.3劑量分組及受試樣品給予時間 實驗設(shè)三個劑量組、一個空白對照組和一個模型對照組，三個劑量組中應(yīng)包括一個人體推薦量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）劑量組。受試樣品給予時間30天，必要時可延長至45天。 1.4 實驗設(shè)計 本實驗使用預(yù)防性高鉛動物模型。 實驗期間，在模型對照組、受試樣品各劑量組飲用醋酸鉛水溶液（推薦濃度為0.1%－0.2%）或喂飼含鉛飼料造模的同時，各劑量組灌胃給予受試樣品或喂飼含不同劑量受試樣品的飼料�？瞻讓φ战M給予去離子水或基礎(chǔ)飼料。 1.5 觀察指標(biāo) 于末次給予動物受試樣品24小時后，稱量動物體重。取血并處死動物，取適量血、肝、股骨樣品進行濕式消化，使用石墨爐原子吸收分光光度計（或ICP-MS等方法）測定鉛含量。 1.6 數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定 一般采用方差分析，但需先進行方差齊性檢驗，方差齊，則計算F值。若F值< F0.05，結(jié)論為各組均數(shù)間差異無顯著性；若F值≥F0.05（即P≤0.05），結(jié)論為各組均數(shù)間差異有顯著性，需進一步使用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計分析。對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)需進行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)分布或方差齊的要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析；若經(jīng)變量轉(zhuǎn)換仍不能達到正態(tài)分布或方差齊的目的，則改用秩和檢驗進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果判定：在動物模型成立的前提下，實驗組與模型對照組比較，骨鉛含量顯著降低，同時血鉛或肝鉛顯著降低，可判定該受試樣品動物實驗結(jié)果為陽性。 2 人體試食試驗 2.1 受試者納入標(biāo)準(zhǔn) 有密切鉛接觸史，血鉛含量較高的自愿受試者。推薦選擇屬于血鉛負(fù)荷偏高的人群，即血鉛在200g/L－400g/L（1mol/L－2mol/L）范圍內(nèi)，或尿鉛在70g/L－120g/L（0.34mol/L －0.58mol/L）范圍內(nèi)者。 2.2 受試者排除標(biāo)準(zhǔn) 2.2.1 血鉛或尿鉛過高，有明顯鉛中毒癥狀者。 2.2.2 患有心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等全身性疾病者。 2.2.3 妊娠和哺乳期婦女。 2.2.4 試驗期間服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對結(jié)果的判斷者。 2.2.5 停服受試樣品或中途加服其它藥物，無法判斷功效或資料不全者。 2.3. 試驗設(shè)計及分組要求 采用自身和組間兩種對照設(shè)計。按血鉛或尿鉛水平對受試者進行隨機分組，在分組時盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如鉛接觸史、年齡、性別等，進行均衡性檢驗，以保證組間的可比性。每組受試者有效例數(shù)不少于50例。 2.4.受試樣品的劑量和使用方法 試食組按推薦服用方法和服用量每日服用受試樣品，對照組可服用安慰劑或采用空白對照。受試樣品給予時間30天，必要時可延長至45天。試驗期間受試者不改變生活、工作環(huán)境，不改變原來生活、飲食習(xí)慣。 2.5.觀察指標(biāo) 2.5.1 安全性指標(biāo) 2.5.1.1 一般狀況（包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等）。 2.5.1.2 血、尿、便常規(guī)檢查。 2.5.1.3 肝、腎功能檢查。 2.5.1.4 胸透、心電圖、腹部B超檢查（各項指標(biāo)于試驗前檢查一次）。 2.5.1.5 尿鈣、尿鋅的測定：測定時間、次數(shù)和方法同尿鉛�？偰蜮}、總尿鋅為試驗開始后3次尿鈣或尿鋅測定值之和。 2.5.2 功效性指標(biāo)： 2.5.2.1 臨床癥狀觀察：準(zhǔn)確記錄受試者試食前后的主觀癥狀，主要觀察頭暈、失眠、四肢無力等癥狀。 2.5.2.2 血鉛、尿鉛含量測定：采集試食試驗前、試驗后血液，以及試食前及試食第10天（如進行45天試驗則為第15天）、20天（如進行45天試驗則為第30天）和結(jié)束時的24小時尿液樣本（亦可以晨尿代替24小時尿，但需用尿肌酐進行校正），測定血鉛、尿鉛含量。總尿鉛為試驗開始后三次尿鉛測定值之和。 2.6 數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定 血鉛、尿鉛、尿鈣、尿鋅等試驗數(shù)據(jù)為計量資料，可用t檢驗進行分析。自身對照資料可采用配對t檢驗；試食后不同觀察時點兩組血鉛、尿鉛的測定值均數(shù)比較以及試食后兩組總尿鉛、總尿鈣、總尿鋅排出量比較采用兩樣本均數(shù)t檢驗。后者需進行方差齊性檢驗，對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)需進行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)分布或方差齊的要求后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進行t檢驗；若經(jīng)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換仍不能滿足正態(tài)分布或方差齊要求，則改用t’檢驗或秩和檢驗。對于變異系數(shù)太大（如CV>50％）的資料，應(yīng)使用秩和檢驗。 結(jié)果判定：試食后，試食組與對照組組間比較，至少兩個觀察時點尿鉛排出量增加且顯著高于試驗前，或總尿鉛排出量明顯增加。同時，對總尿鈣、總尿鋅的排出無明顯影響，或總尿鈣、總尿鋅排出增加的幅度小于總尿鉛排出增加的幅度，可判定該受試樣品具有促進排鉛功能。 |
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unfemale9樓2012-05-10 08:38:07
簡單回復(fù)
2012-05-02 21:34
回復(fù)
unfemale(金幣+1): 謝謝參與
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