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BamH1酶切不充分
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大家好，我的實驗現(xiàn)在遇到一個難題，想不通，質(zhì)粒里面只有一個BamH1酶切位點BamH1是插入一段序列引入的一個位點，本來想著再利用BamH1和Xho1雙酶切再引入一個長一點的片段，可是自連接長菌較多，后來對質(zhì)粒分別做了BamH1和Xho1的單酶切鑒定，得到圖1中所示:1、2不同菌落所提的質(zhì)粒，3、4是1、2質(zhì)粒分別BamH1單酶切，5、6是Xho1單酶切。圖2是插入帶有BamH1片段前后的質(zhì)粒做Xho1單酶切對照。 大家?guī)臀曳治鲆幌率敲盖胁怀浞謫�？酶沒有問題，做其他的質(zhì)粒單酶切能切開。而且看圖2應(yīng)該是帶有BamH1的片段插入進(jìn)去了。 我感覺目前最好的方法是測序，但是我跟導(dǎo)師提了幾次測序，她都不同意；我又猜想是不是甲基化了，但是導(dǎo)師說同是用TOP10提的質(zhì)粒，別的都沒有甲基化問題，所以把這個原因也排除了。我現(xiàn)在不知道問題出在哪？ 圖片1 圖片2 |
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2樓2012-05-07 19:59:47
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