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chiscien
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[交流]
培養(yǎng)細(xì)胞的純化的方法 已有2人參與
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培養(yǎng)細(xì)胞的純化： 1、自然純化 即利用某一種類細(xì)胞的增殖優(yōu)勢(shì)，而排擠其他細(xì)胞生長(zhǎng)，靠自然的增值潛力最后留下生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)細(xì)胞，去除其他細(xì)胞。有些惡性腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)此方法，自然純化建立細(xì)胞系。 2、人工純化 （1）酶消化法 在消化培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，常是成纖維細(xì)胞先脫壁，而上皮細(xì)胞要消化相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間才脫壁，特別是在原代培養(yǎng)和培養(yǎng)早期這種差別尤為明顯，因而可以利用這種差異采用多次差別消化方法將上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分開(kāi)。 （2）機(jī)械劃除法 原代培養(yǎng)成功后，上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞所數(shù)都同時(shí)出現(xiàn)，混雜生長(zhǎng)。這種混雜生長(zhǎng)常常分區(qū)成片，每種細(xì)胞都以小片或區(qū)域性分布的方式生長(zhǎng)在瓶壁上。因此可以采用機(jī)械的方法去除不需要的細(xì)胞。 （3）反復(fù)貼壁法 成纖維細(xì)胞與上皮細(xì)胞相比，其貼壁過(guò)程快，大部分細(xì)胞常能在短時(shí)間內(nèi)大約10－30min完成附著過(guò)程，而上皮細(xì)胞大部分在短時(shí)間內(nèi)不能附著或附著不穩(wěn)定，稍加振蕩即浮起，這樣可以利用此差別來(lái)純化細(xì)胞。 （4）克隆法 采用細(xì)胞克隆法將細(xì)胞分成單個(gè)細(xì)胞，使之分別生長(zhǎng)成克隆，選擇出所需要的克隆。 |
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2樓2012-05-11 12:05:14
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3樓2012-10-15 13:50:07
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