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chiscien
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培養(yǎng)細胞的純化的方法 已有2人參與
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培養(yǎng)細胞的純化: 1、自然純化 即利用某一種類細胞的增殖優(yōu)勢,而排擠其他細胞生長,靠自然的增值潛力最后留下生長優(yōu)勢細胞,去除其他細胞。有些惡性腫瘤細胞可以通過此方法,自然純化建立細胞系。 2、人工純化 (1)酶消化法 在消化培養(yǎng)細胞時,常是成纖維細胞先脫壁,而上皮細胞要消化相當長的時間才脫壁,特別是在原代培養(yǎng)和培養(yǎng)早期這種差別尤為明顯,因而可以利用這種差異采用多次差別消化方法將上皮細胞和成纖維細胞分開。 (2)機械劃除法 原代培養(yǎng)成功后,上皮細胞和成纖維細胞所數(shù)都同時出現(xiàn),混雜生長。這種混雜生長常常分區(qū)成片,每種細胞都以小片或區(qū)域性分布的方式生長在瓶壁上。因此可以采用機械的方法去除不需要的細胞。 (3)反復貼壁法 成纖維細胞與上皮細胞相比,其貼壁過程快,大部分細胞常能在短時間內(nèi)大約10-30min完成附著過程,而上皮細胞大部分在短時間內(nèi)不能附著或附著不穩(wěn)定,稍加振蕩即浮起,這樣可以利用此差別來純化細胞。 (4)克隆法 采用細胞克隆法將細胞分成單個細胞,使之分別生長成克隆,選擇出所需要的克隆。 |
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