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yeedro鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
關(guān)于動物細胞體外培養(yǎng)的問題
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之前發(fā)過帖子詢問過，有兩個回復(fù)帖子就沒人理了，可是問題沒問完，只好重開一個帖子了。 之前的問題是“細胞干了之后多久死亡？”這里主要說的是哺乳動物的細胞，比如人的白細胞。有大蝦回答“一般了干了幾小時，再加培養(yǎng)基，細胞也可以活的。但只要干了幾分鐘，對細胞就會有影響，哺乳動物的細胞沒有細胞壁，所以維持滲透壓很重要的，對細胞的性狀會有影響的�！薄� 于是我又有問題了，那過多久細胞徹底沒救呢？十幾個小時？幾十個小時？能具體些嗎？ 還有，干幾分鐘對細胞就會有影響，那會有些什么影響呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
amisking: 金幣+4, BioEPI+1, 鼓勵發(fā)帖幫助解答問題。 2012-05-18 19:53:16
amisking: 金幣+4, BioEPI+1, 鼓勵發(fā)帖幫助解答問題。 2012-05-18 19:53:16
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我個人認為： 1、細胞暴露與空氣中，O2對他傷害較大，因為細胞培養(yǎng)是需要厭氧環(huán)境的。 2、至于干，一般倒液后都會有殘留，還是能維持一段時間的，但液面會很低，此時細胞外的緩沖液由于變少緩沖能力下降，pH多少應(yīng)該也會發(fā)生變化，會對細胞不利。 至于影響有多大，要看你要檢測的東西是什么？ 我見過有專做酸度輕微改變對腫瘤細胞的影響的 有做O2損傷的 如果你還有細胞就重新復(fù)一個。如果只是感性趣討論，無所謂，個人個觀點或是去找文獻找證據(jù)。 如果是按protocol做實驗，這做的有點問題，最好是重做，有些時候問題可能不能即可體現(xiàn)出來，但萬一做了很久才出來，那就來不及了。 |
2樓2012-05-18 14:46:15
小周
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3樓2012-05-18 17:05:15
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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首先對于樓上的爭議表達自己的見解：細胞培養(yǎng)是需要氧氣的，要滿足基本的呼吸作用，肯定都是有氧呼吸了。產(chǎn)生誤解的原因可能是5%的二氧化碳，它的作用只是為了保持培養(yǎng)基緩沖系統(tǒng)維持一定的PH值，這個對于細胞的生存是必須的。所以與空氣接觸一說，個人認為是無稽之談。 其次，細胞表面并不是光滑的，在細胞培養(yǎng)一段時間后，會有細胞外基質(zhì)的出現(xiàn)，這些特殊的物質(zhì)會有一定的固水性，在換液等操作短時間的暴露應(yīng)該問題不大，當(dāng)然越迅速越好。如果不可避免長時間的暴露，建議將超凈臺的風(fēng)速調(diào)小或者直接關(guān)掉。 |
4樓2012-05-19 17:20:00
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5樓2012-05-21 10:57:07
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