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yeedro鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)
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[求助]
關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的問(wèn)題
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之前發(fā)過(guò)帖子詢問(wèn)過(guò)，有兩個(gè)回復(fù)帖子就沒(méi)人理了，可是問(wèn)題沒(méi)問(wèn)完，只好重開(kāi)一個(gè)帖子了。 之前的問(wèn)題是“細(xì)胞干了之后多久死亡？”這里主要說(shuō)的是哺乳動(dòng)物的細(xì)胞，比如人的白細(xì)胞。有大蝦回答“一般了干了幾小時(shí)，再加培養(yǎng)基，細(xì)胞也可以活的。但只要干了幾分鐘，對(duì)細(xì)胞就會(huì)有影響，哺乳動(dòng)物的細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁，所以維持滲透壓很重要的，對(duì)細(xì)胞的性狀會(huì)有影響的�！�。 于是我又有問(wèn)題了，那過(guò)多久細(xì)胞徹底沒(méi)救呢？十幾個(gè)小時(shí)？幾十個(gè)小時(shí)？能具體些嗎？ 還有，干幾分鐘對(duì)細(xì)胞就會(huì)有影響，那會(huì)有些什么影響呢？ |
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鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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首先對(duì)于樓上的爭(zhēng)議表達(dá)自己的見(jiàn)解：細(xì)胞培養(yǎng)是需要氧氣的，要滿足基本的呼吸作用，肯定都是有氧呼吸了。產(chǎn)生誤解的原因可能是5%的二氧化碳，它的作用只是為了保持培養(yǎng)基緩沖系統(tǒng)維持一定的PH值，這個(gè)對(duì)于細(xì)胞的生存是必須的。所以與空氣接觸一說(shuō)，個(gè)人認(rèn)為是無(wú)稽之談。 其次，細(xì)胞表面并不是光滑的，在細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)有細(xì)胞外基質(zhì)的出現(xiàn)，這些特殊的物質(zhì)會(huì)有一定的固水性，在換液等操作短時(shí)間的暴露應(yīng)該問(wèn)題不大，當(dāng)然越迅速越好。如果不可避免長(zhǎng)時(shí)間的暴露，建議將超凈臺(tái)的風(fēng)速調(diào)小或者直接關(guān)掉。 |
4樓2012-05-19 17:20:00
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
amisking: 金幣+4, BioEPI+1, 鼓勵(lì)發(fā)帖幫助解答問(wèn)題。 2012-05-18 19:53:16
amisking: 金幣+4, BioEPI+1, 鼓勵(lì)發(fā)帖幫助解答問(wèn)題。 2012-05-18 19:53:16
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我個(gè)人認(rèn)為： 1、細(xì)胞暴露與空氣中，O2對(duì)他傷害較大，因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)是需要厭氧環(huán)境的。 2、至于干，一般倒液后都會(huì)有殘留，還是能維持一段時(shí)間的，但液面會(huì)很低，此時(shí)細(xì)胞外的緩沖液由于變少緩沖能力下降，pH多少應(yīng)該也會(huì)發(fā)生變化，會(huì)對(duì)細(xì)胞不利。 至于影響有多大，要看你要檢測(cè)的東西是什么？ 我見(jiàn)過(guò)有專做酸度輕微改變對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響的 有做O2損傷的 如果你還有細(xì)胞就重新復(fù)一個(gè)。如果只是感性趣討論，無(wú)所謂，個(gè)人個(gè)觀點(diǎn)或是去找文獻(xiàn)找證據(jù)。 如果是按protocol做實(shí)驗(yàn)，這做的有點(diǎn)問(wèn)題，最好是重做，有些時(shí)候問(wèn)題可能不能即可體現(xiàn)出來(lái)，但萬(wàn)一做了很久才出來(lái)，那就來(lái)不及了。 |
2樓2012-05-18 14:46:15
小周
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3樓2012-05-18 17:05:15
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5樓2012-05-21 10:57:07
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