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藍(lán)葉子0558新蟲 (初入文壇)
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求解:Taqman MGB實(shí)時(shí)熒光定量PCR空白對照組熒光信號很強(qiáng)怎么回事?
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Taqman MGB實(shí)時(shí)熒光定量PCR空白對照組熒光信號很強(qiáng)怎么回事? PS:已排除污染狀況。 探針序列為:VIC-TAG CCG CCT TCG CCA-MGB 附圖:圖中所有曲線均為空白對照組。 [ Last edited by 藍(lán)葉子0558 on 2012-5-22 at 10:36 ] |
新蟲 (初入文壇)
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引物自身環(huán)化造成的,和模板無關(guān),建議1:將設(shè)計(jì)引物和探針的報(bào)告圖片截取傳上來,分析研究;2:相對來說,探針-探針本身不一定有,大部分這樣種情況都屬于 探針-引物所形成的二聚體,4樓的說法很專業(yè)啊(http://wenku.baidu.com/view/cefc2d573c1ec5da50e270f2.html 附網(wǎng)址 探針設(shè)計(jì)注意事項(xiàng));3:同時(shí),還要防止探針的解鏈溫度高于引物,會影響引物效率,應(yīng)將探針3'端完全磷酸化;4:模板污染問題。 |
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