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alert_pqs新蟲 (初入文壇)
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[求助]
小分子蛋白電泳marker
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| 以前電泳marker的條帶還好，有6條，但現(xiàn)在，后面的3條基本看不清楚了，應(yīng)該不是電泳時間過長而跑出去了，模模糊糊可以看清，像是擴散了，請各路大神指點，附圖，謝謝！ |
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2012-05-28 22:58:07, 1.91 M
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+5, 解答還是全面，學(xué)習(xí)啦~ 2012-05-30 10:34:13
zhaohq1209: 回帖置頂 2012-05-30 10:34:15
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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zhaohq1209: 回帖置頂 2012-05-30 10:34:15
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這個問題現(xiàn)象我以前好像見過的，可能有幾個方面： 第一，你電泳時電壓過高，我一般電泳時都是用很低的電壓先跑個半小時，之后再加大到正常情況跑，放心不會擴散 第二，你膠沒有制備好，或者沒有充分凝和，這個不是很清楚是不是這個原因 第三，你染色時間稍微延長一點，最后洗脫再干凈一點就差不多 |
10樓2012-05-30 09:08:40
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【答案】應(yīng)助回帖
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telomerase: 金幣+3, 辛苦辛苦 2012-05-30 09:23:14
zhaohq1209: 金幣+3, tricine是一種緩沖液吧，貌似在MOPS培養(yǎng)基中用過的 2012-05-30 10:33:47
telomerase: 金幣+3, 辛苦辛苦 2012-05-30 09:23:14
zhaohq1209: 金幣+3, tricine是一種緩沖液吧，貌似在MOPS培養(yǎng)基中用過的 2012-05-30 10:33:47
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那就是擴散了，Tricine-SDS-PAGE中的Tricine在電泳時具有濃縮樣品的作用，讓小分子樣品在濃縮膠時用很好的濃縮效果，并且在分離膠時保持很窄的條帶，用Gly代替Tricine就會出現(xiàn)10kDa以下的條帶看不到或者很模糊的情況。 把電泳緩沖液換成Tricine試試吧 |
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9樓2012-05-30 00:45:34
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