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Marado金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
Dreamer
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[求助]
求大神分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果-轉(zhuǎn)化
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對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行加A尾，體系如下： PCR產(chǎn)物：40ul 10XTaq Bufferz：5ul dATP：4ul Taq(2.5U/ul)：1ul 總體系：50ul 反應(yīng)條件：72℃，1h 之后直接取加A尾的PCR產(chǎn)物進(jìn)行連接，體系如下： 加A后PCR產(chǎn)物：2ul pMD 19：0.5ul Buffer（solution I）3.5ul 過(guò)夜連接：12-16h 之后用JM109感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化 涂LE平板（1ml的100mg/ml 氨芐加入到1L的LB培養(yǎng)基） 昨天下午2點(diǎn)半涂完平板（100ul菌液） 37℃培養(yǎng)到晚上10點(diǎn)半，之后置于室溫下（20℃）到今早，發(fā)現(xiàn)沒(méi)長(zhǎng)- -，請(qǐng)問(wèn)各位大神，可能是哪個(gè)步驟出現(xiàn)了問(wèn)題，PCR新手，望指教. |
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3樓2012-06-12 22:21:43
Marado
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2樓2012-06-12 20:48:19
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