 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2238 | 回復(fù): 9 | ||
[求助]
陽性克隆的鑒定
|
| 挑轉(zhuǎn)化后平板上的單菌落提質(zhì)粒進(jìn)行鑒定，質(zhì)粒雙酶切正確，PCR鑒定跑膠總沒有條帶，誰知道什么原因啊，幫幫忙吧！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有90人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 我將1質(zhì)粒連在BK載體上，但是陽性克隆鑒定一直是陰性，什么原因呢
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 急求 G418篩選相關(guān)問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 載體連接pcr片段一直連不上
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 克隆假陽性的問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 鑒定陽性克隆
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 陽性克隆的鑒定問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于畢赤酵母電轉(zhuǎn)化
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助/交流】菌液PCR鑒定陽性克隆時(shí)，總出現(xiàn)CK
已經(jīng)有4人回復(fù)
2樓2012-06-13 17:02:58
504775490
金蟲 (知名作家)
- 應(yīng)助: 51 (初中生)
- 金幣: 5689.2
- 散金: 1155
- 紅花: 22
- 帖子: 9590
- 在線: 290小時(shí)
- 蟲號: 1309424
- 注冊: 2011-05-29
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2012-06-13 17:08:17
hyacinth326
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 74 (初中生)
- 金幣: 2003.3
- 散金: 304
- 紅花: 4
- 帖子: 394
- 在線: 1338.8小時(shí)
- 蟲號: 1502977
- 注冊: 2011-11-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物資源與分類學(xué)
4樓2012-06-13 17:43:26
mutou1025
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 1711.5
- 帖子: 150
- 在線: 83.5小時(shí)
- 蟲號: 1209061
- 注冊: 2011-02-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 光譜分析
5樓2012-06-13 19:01:01
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
6樓2012-06-15 18:08:42
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
7樓2012-06-15 19:31:56
hylee103
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1164.2
- 散金: 215
- 紅花: 4
- 帖子: 451
- 在線: 357.3小時(shí)
- 蟲號: 1816233
- 注冊: 2012-05-14
- 性別: MM
- 專業(yè): 病毒學(xué)
8樓2012-12-19 21:44:36
|
具體如下： PCR法： 1.準(zhǔn)備好PCR管，加入6ul水/管。 2.用tip頭挑起菌落，在1中來回吹吸幾次。 3. 在2中用的tip頭，可以直接在另一塊LB板上劃線培養(yǎng)。 4. 加入PCR mixture，PCR鑒定即可。注意做過陽性，陰性對照。 我常用此法做TA克隆鑒定，也可以用于載體構(gòu)建鑒定，無需提質(zhì)粒，很實(shí)用。 CRACKING法： 1. 將長出的克隆，劃線到另一塊抗性LB板，培養(yǎng)，使均線長大較為粗大。 2.于PCR管中加入水6ul/管，挑1均線，盡可能挑取，混勻于水中。 3.加入6ul含有l(wèi)oaddingbuffer的2×cracking 液（20%蔗糖＋0.5%SDS+0.5M NaOH），來回吹吸混勻，點(diǎn)樣，跑膠即可。 適用于載體構(gòu)建菌落鑒定，最好是插入片段較大的（大于1kb），好區(qū)分。無需酚仿等有毒物質(zhì)參與，安全！ |
9樓2012-12-19 23:03:55
10樓2012-12-20 10:51:21
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 da_da 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料080500調(diào)劑求收留 +5 | 一顆meteor 2026-03-13 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+7
|
.6lL 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +3 | 申子申申 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | ydfyh 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +5 | 想上岸的鯉魚 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +8 | 陌宸希 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)336分求調(diào)劑 +6 | zbzihdhd 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +9 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] [導(dǎo)師推薦]西南科技大學(xué)國防/材料導(dǎo)師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)383 求調(diào)劑 +3 | 藥學(xué)chy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 080500，材料學(xué)碩302分求調(diào)劑學(xué)校 +4 | 初識可樂 2026-03-14 | 5/250 |
|